河南省家畜的三种肠道原虫分子流行病学调查

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1、分类■单位代码：丨密级：予号：博士位论文河南省家畜的三种肠道原虫分子流行病学调查研究生：王海燕导教师：汪明教授作指导教师：张龙现教授中请学位类别：兽医博士专业领域名称：预防兽医研究方向：所在学院：动物医学院独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中已经注明引用和致谢的内容外，论文中不包含本人和其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作

2、者签名：时间：年月日关于学位论文使用授权的说明本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定。本人同意中国农业大学有权保存及向国家有关部门和机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人同意中国农业大学将本学位论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国博士学位论文全文数据库》或《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。保密的学位论文在解密后应遵守此协议）时间：年学位论文作者签名：上月日导师签名：时间：：。七年■月：日中文摘要贾第虫、隐孢子虫、微孢子虫是是重耍的人畜共患肠道原虫，可感染人、宠物和多种家畜，它们在动物

3、和人群中的基因型分布、宿主特异性、传播特点等方面的研究在我国鲜有报道。为了解三种肠道原虫在河南省奶牛、绵羊和猪的流行情况及基因型分布特征，本文开展了分子流行病学调查研究。采用卢戈氏碘检查法分别对河南省个奶牛场、个绵羊场和个养猪场的份奶牛、份绵羊和份猪新鲜粪样进行检查，分别在个奶牛场、个绵羊场和个养猪场检测到阳性十二指肠贾第虫包囊，总感染率分别为、和；其中以月龄以下犊牛、月龄以下羔羊和仔猪的十二指肠贾第虫病感染率最高。采用贾第虫多位点分析法（基于、、和基因）对份奶牛贾第虫阳性样品、份绵羊贾第虫阳性样品、份猪粪样品进行了贾第虫基因型鉴定。在奶牛、

4、绵羊和猪体中共鉴定山个基因型，分别为人畜共患的基因型奶牛：个，绵羊：个，猪：个）和家畜特有的基因型奶牛：个，绵羊：个，猪：个）。基于基因的序列进化树显示，河南省牛、羊和猪的十二指肠贾第虫基因型和基因亚型间无严格宿主特异性；其中，奶牛和绵羊的基因型和基因型可分成多个多位点基因亚型（，系统进化树显示，所有的均构成独立的分支，提示河南省十二指肠贾第虫可能存在地理隔离和适应性变异；奶牛源的亚型与国外人源的亚型相似性为，提示贾第虫存在人与奶牛之间传播和流行的可能性。采用饱和蔗糖溶液漂浮法对份小于月龄的奶牛椟牛、份猪粪样进行隐孢子虫检测。镜检阳性率为分别

5、为和。基丁基因法对所冇犊牛、猪的粪样进行隐孢子虫种鉴定，奶牛中发现四个虫种：个）、个）、个）和个），其中是该奶牛场月龄以下楼牛的优势虫种。基于基因位点对犊牛源微小隐孢子虫进行基因亚型鉴定，鉴定出存在人畜共患基因亚型；猪类样品中发现个）和个）。。利用序列对份猪粦样进行毕氏肠微孢子虫检测，发现性样品份，总感染率为；对份猪阳性毕氏肠微孢子虫进行基因型鉴定，共鉴定出个基因型，包含、、、和个已报道的基因型和一个新的基因型。种系发育分析显示所有的基因型均位于毕氏肠微孢子虫基因型的群中，属于人兽共患的致病群。河南省是全国家畜存量最大的省份之一，家畜的排泄物

6、数量巨大，存在环境特别是饮用水源被污染的风险。以上家畜的三种肠道原虫的分子流行病学调查为人畜共患肠道原虫病的风险分析提供了基础资料和溯源工具。关键词：贾第虫，隐抱子虫，微孢子虫，家畜，分子流行病学，AbstractGiardia,CryptosporidiumandMicrosporidiaareimportantzoonoticintestinalprotozoasthatinfecthumans,livestockandwildlife.Therearefewreportsabouttheirdistribution,transmissi

7、onandhostspecificityinanimalsandhumansinChina.Tounderstandthedistributionandmolecularcharacterofthreeintestinalprotozoasondairycatties,sheepandpigsinHenanprovince,wecarriedoutthestudyofmolecularepidemiology.1777dailycattlefecalsampleson15differentintensivefarms,716ofsheepfr

8、om9farmsand897ofpigon10intensivefarmswererandomlycollectedandexaminedwithLugol'sio