毛果杨ptrhox14和ptrhox52基因功能研究

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1、学巧代妈:10225学号-:S15717於兴扭义.山巧片媽i-.■.-‘v帛':;'一.、、'v;;;5鸿学侄冷文,夢._.’■■,毛果杨戶妒和/Vr//ar52基因功能研究毛旭壳指导教师姓名:李成浩教授东北林业大学杨静莉讲师东北林业大学申请学位级别:硕±学科专业:林木遗传育种论文提交日期:2015年4巧论文答辩日期;2015年6月授予学位单位;东北林业火学授予学位日期;2015年6月答辨委员会主席:论文评阔人:

2、京如大聲UniversitCode:10225yRegisterCode;SI5717DissertationfortheDegreeofMasterTheenefunctionresearchofPtrHoxMandgPtrHox52Candidate:XulianMaogSuervisor:Prof.ChenaoUpghAssociateSuervisor;JinliYanpggAcademicDeree

3、Aliedfor;MastergppSpeciality:For的tTreeGeneticsandBreeding*DafOltJune2015;eofiaExaminaion:13titi,University:NortheastForestryUniversity摘要摘要>同源异型-亮氨酸拉链(HD-Zn)基因是植物同源异型结构域HD基因中最丰富的家族-,且为植物所特有。根据DNA结合特异性、基因结构、共同基序W及生理功能可--

4、--Zis4Z-。将HDp蛋白分为个亚类:HDipI、HDZipII、HDZipIII和HDZipIV拟南-Z芥中HDipI基因在植物的胚胎发生和去黄化中起到作用,同时在植物应答ABA、水缺失-、盐胁迫和光条件改变时也起到重要作用,水稻、玉米中也鉴定出HDZipI中参与-非生物胁迫的基因。在毛果杨中Ar巧0x74和戶托好〇如2旁系同源基因属于HDZiI亚,p一类中的类基因类的还有化航义22、化研x24、A好方7、如好化?2等,Y,同属于这这些基因己被

5、鉴定参与抗旱耐盐胁迫。本文对毛果杨中巧r好和At巧如52基因进行初步的功能分析。首先从毛果杨中克隆了Ar/妃和f/r/foxW基因,并对其进行亚细胞定位分析发现两个基因都定位于细胞核中。利用网站PlantCA肥和PLACE对启动子分析发现,启动子中都有光应答和干旱诱导的MYB结合位点,在Ar分OX:口肩动子还含有ABA应答原件(ABRE)原件,初步推测Ar月和巧W化如2基因可能与非生物胁迫和光应答相关。在不同时间点(Oh、3h、6h、12h和24h)对毛果杨不同

6、组织(根、茎、叶、茎尖)在ABA、NaCl、Mannitol和SA胁迫下的表达模式进行了分析,发现巧r好W八和Ari妨cリ在ABA、NaCl和Mannitol作用下除根部表迭变化不明显外,其他组织中都发生显著的上调表达。通过花序浸染法获得转基因巧ri拟c52拟南芥,对其进行ABA、NaCl和Mannitol胁迫处理,结果发现相对于其他处理,转基因At/姑c52拟南芥的抗盐性比较明显。随后对±培的野生型和转基因掛南芥进行盐处理,通过叶片组织染色观察叶片内H02和2CV含

7、量,发现转基因拟南芥活性氧ROS含量低于野生型。同时,测量300mMNaCl胁迫3d后的MDA含量及SOD、POD活性,发现转基因中MDA含量低于野生型,氧化酶SOD和POD活性要高于转基因型,送些结果表明过表达巧rWbx:口转基因拟南芥可能通过启动抗氧化酶系统来提高耐盐性的。将ffri/ox八和巧r//ox52通过农杆菌介导法分别转入大青杨中,通过DNA和RNA水平筛选检测分别获得13个和5个过表达转基因株系aCl、Mannitol胁迫。对其进行N观察根部和根上部生

8、长情况,发现转基因植株的生根和生长发育要优于野生型大青杨,一?巧W初步表明过表达戶化好和戶C52基因能提高大青杨的抗逆性。为下步研究其在非生物胁迫下的抗逆机制提供新品种实验材料和基本理论基础。-Z关键巧拟南巧;非生物胁迫;HDip转录因子;抗盐分析;活性氧--IAbstractAbstractH-er-omeodomai打leucinezipp(HDZip)genesarethemostabu打过antgroupoflate-familo

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