棉蚜对吡虫啉靶标抗性分子检测技术研究

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1、密级:论文编号:中囯农业科学院学位论文棉赃对批虫啉IG标抗性分子检测技术研究DevelopmentofMolecularTechniquetoDetecttheTarget-resistanceofImidaclopridinAphisgossypiiGlover硕士研究生：张靖指导教师：芮昌辉研宄员申请学位类别：农学硕士专业：研究方向：培养单位：植物保护研究所研宄生院•_：c-_■■■-1..■提交日期2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSci

2、encesDissertationDevelopmenttheMolecularTechniquetoDetecttheTargeted-resistanceofImidaclopridinAphisgossypiiGloverM.S.Candidate：ZhangJingSupervisor：Prof.RuiChanghuiMajor：PesticideScienceSpecialty:PesticidetoxicologyChineseAcademyofAgriculturalSciencesMa

3、y2015独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研宄成果^尽我所知，除了文中特別加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一问丄作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研宄生签名:时间：2邮年6月之日关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留'使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查

4、阅和借阅，可以采用影印、缩卬或扫描等复制手段保存、汇编学位论文d司意中国农业科学院可以用不同方式在不N媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研宄生签名讀时间：年《月>口导师签名:时间：年t月曰中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目棉蚜对吡虫啉靶标抗性分子检测技术研宂农药毒理与专业农药学研宄方向论文作者张靖应用工艺学中国农业科学院植物培养单位（研宄所）T保指导教师芮昌辉护研究所硕（博）单位专业签名姓名职称导师硕导口评博导口阅硕导口人博导口答农业昆虫与辩硕导口高希武教授中国农业大学

5、主博导v害虫防治彻、席农业昆虫与硕导口中国农业大学高希武教授博导v害虫防治魏r硕导口中国农业大学植物病理学刘西莉教授博导VL答硕导口作物栽培学中国农业大学王保民教授博导V与耕作学辩硕导□中国农业科学院植物农药学袁会珠研究员刺:博导V保护研究所委硕导V中国农业科学院植物卜农药学杨代斌副研究员博导口保护研宄所贝硕导□博导口硕导口博导口闫晓静会议记录(秘书）2015年5月28日14:30植保所第一会议室论文答辩时间地点_______________________摘要棉蚜AphisgossypiiGlove

6、r（Hemiptera:Aphididae）是一种重要的世界性农业害虫，是为害棉花的主要害虫之一，在中国各个棉区都有发生。作用于昆虫烟碱型乙酰胆碱受体（nicotinicacetylcholinereceptor，nAChR）的新烟碱类杀虫剂吡虫啉广泛用于棉蚜的防治。但是随着吡虫啉使用范围的扩大和使用频率的增加，棉蚜对吡虫啉的抗性在全世界都有报道。研究表明抗吡虫啉棉蚜烟碱型乙酰胆碱受体β1亚基发生精氨酸向苏氨酸的突变（R81T）。在此基础上，本文建立竞争性等位特异性PCR技术（cPASA）和实时荧光定

7、量等位特异性PCR技术（rtPASA）检测棉蚜nAChRβ1亚基R81T的突变频率，从而明确田间棉蚜种群对吡虫啉的抗性水平。1.吡虫啉对棉蚜田间种群毒力测定采用浸叶法，测定了山东德州（DZ）、北京（BJ），河南许昌（XC）、河北邯郸（HD）和廊坊（LF）五个地区棉蚜种群对吡虫啉的敏感性。结果表明，五个地区的棉蚜种群对吡虫啉敏感度不同。河南许昌（XC）和北京种群（BJ）对吡虫啉较为敏感，LC50值分别为1.03μg/mL和0.87μg/mL。河北邯郸（HD）棉蚜种群对吡虫啉也处于较敏感阶段，其LC50值

8、为3.74μg/mL；河北廊坊种群（LF）和山东德州种群（DZ）对吡虫啉均有一定的抗性，LC50值分别为20.70μg/mL和44.90μg/mL。将北京种群（BJ）作为敏感种群，河北邯郸（HD）棉蚜种群的相对抗性倍数为4.3倍，未达到抗性水平；廊坊种群（LF）和山东德州种群（DZ）的相对抗性倍数分别为23.8倍和51.6倍，处于中高抗水平。2.棉蚜抗、感种群烟碱型乙酰胆碱受体β1亚基基因克隆以棉蚜的BJ敏感种群和DZ、LF抗性种群为实验材料，对烟碱型乙