杭白菊病毒病原鉴定及脱毒苗生物学性状与品质性状分析

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1、分类号：单位代码：密级：学号硕士学位论文杭白菊病毒病原鉴定及脱毒苗生物学性状与品质性状分析申请人姓名：刘辉辉指导教师：毛碧增专业名称：生物化学与分子生物学研究方向：楦物病理学所在学院：农业与生物技术学院论文提交日期分类号：：单位代码密级：学号硕士学位论文杭白菊病毒病原鉴定及脱毒苗生物学性状与品质性状分析申请人姓名：刘辉辉指导教师：毛碧增专业名称：生物化学与分子生物学研究方向：植物病理学所在学院：农业与生物技术学院论文提交日期杭白菊病毒病原鉴定及脱毒苗生物学性状与品质性状分析论文作者签名：指导教师签名：论文评阅人评阅人评阅人评阅人答辩委员会主席：屠幼英教授浙江大学委员俞旭平高级工程师浙江

2、省中药研究所委员毛碧增教授浙江大学委员：安千里副教撥浙江大学委员答辩日期：课题来源浙江省中药材农业新品种选育重大科技专项（健康种苗快繁及规范化技术示范（桐乡市农业技术推广服务中心；中药材安全生产技术与信息管理体系研究及示范（“三农六方”科技协作计划项目合同编号浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人巳经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得浙江大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学

3、位论文作者签名签字日期：年学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解浙江大举有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权江大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。保密的学位论文在解密后适用本授权书）浙江大学硕士学位论文致谢致谢该论文是在毛碧增老师的悉心指导下完成的。回首攻读硕士的三年，无论在科学研究还是日常生活中，毛老师都给予我以无徵不至的帮助与关怀。毛老师时刻关注着我的试验进展，从论文选题，到试验设计、试验进展，从开题报告到论文的撰写修改、定稿及答辩，毎一个环节都

4、凝聚着她的精力和心血。毛老师治学作风严谨、工作态度认真，她对学生孜孜不倦的教导尤其是忘我的工作精神使我终生受益，也是我终生学习的楷模，将时刻激励着我为追求更高的目标而努力。论文完成之际，谨向导师毛碧增老师致以崇高的敬意和衷心的感谢。本论文的试验和撰写工作是在农学院及桐乡市农业技术推广中心完成。在实验室工作中，我有幸结识了一群热情向上的师兄、师姐、师弟和师妹们，李坤峰、刁清清、董峰丽、张亚慧、陈复旦、刘振、徐泽凌、吴李芳、曾欣等与我朝夕相处的兄弟組妹们在试验过程中也给予了我诸多帮助，非常感谢你们与我一起度过那些日子；同时感谢生物所的吴建祥老师、洪健老师、食品所沈建福老师实验室、浙江省农科

5、院陈志老师给予试验上的指导及桐乡市农业技术推广中心的沈学根老师、周建松老师在我的试验中给予我的帮助，谢谢你们！此外，感谢我的父母，他们含辛茹苦地养育我包容我培养我；感谢我的妹妹一直关心着我，亲情的支撑是我努力向上的源泉，因为他们在生活上给予我无徵不至的关怀，精神上给予我的安慰和鼓励，学业上给予我奠大的支持和帮助，使我顺利走到今天。最后，再次向所有给予我帮助，支持和关心我的亲人，老师，同学表示衷心的感谢！刘辉辉二零一五年一月于浙大紫金港浙江大学硕士学位论文摘要摘要杭白菊（是浙江省桐乡市的主要特产，是浙江省八大名药材“浙八味之一，近年来由于病毒病爆发严重影响了抗白菊的产量和品质，为此本文着

6、重展开了分离和鉴定危害桐乡市杭白菊的主要病毒病原，创制了杭白菊脱毒健康种苗，并分析了脱毒对杭白菊生物学性状及品质性状的影响。主要研究结果如下：调研了主产区桐乡市杭白菊专业合作社，发现几个重要种植基地病毒感染严重，病株的主要症状为叶片斑纹明显，花叶，分枝少，严重地块叶片呈褐色斑枯，楦株枯死，致使菊花产量下降、品质变劣。综合运用病毒粒子形态、检测、检测及序列测定等技术进行病原菌鉴定，透射电镜下观察到病株汁液含略微弯曲的杆状病毒粒子；应用菊花病毒（抗体进行检测结果为阳性，对阳性结果进行分子水平检测发现外売蛋白编码序列长度为，测序结果在中进行比对，发现与报道的编码菊花病毒外壳蛋白的核苷酸序列登

7、录号：相似度最高为，可确定扩增片段为菊花病毒的外壳蛋白基因，明确了侵染浙江省桐乡杭白菊的病毒病原为。采用‘‘多步分步法”创制脱毒种苗，建立了杭白菊脱毒健康种苗的快速繁殖体系，外植体最佳的消毒处理为乙醇氯化汞，成活率为最适宜茎段生长壮苗的培养基为最佳生根培养基为生根率为待植株株高为根数为条，根长约时移栽到温室内生长，成活率可达。在解剖镜下剥取无菌苗茎尖，接种到培养基中进行茎尖苗的诱导，茎尖成活率约经透射电镜、及等方法检测，获得脱除的杭白菊苗。经田