基于量子点的超灵敏电化学免疫传感器检测结核感染的研究

《基于量子点的超灵敏电化学免疫传感器检测结核感染的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、暨南大学硕士学位论文题名（中英对照）：基于量子点的超灵敏电化学免疫传感器检测结核感染的研究UltrasensitiveElectrochemicalImmunosensorBasedonQuantumDotsfortheDetectionofTuberculosisInfection作者姓名：黄鸿兴指导教师姓名及学位、职称：江振友教授学科、专业名称：基础医学、免疫学学位类型：学术学位论文提交日期：论文答辩日期：答辩委员会主席：论文评阅人：学位授予单位和日期：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。

2、除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得暨南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解暨南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权暨南大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密

3、的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签名：签字日期：年月日签字日期：年月日学位论文作者毕业后去向：工作单位：电话：通讯地址：邮编：暨南大学硕士学位论文基于量子点的超灵敏电化学免疫传感器检测结核感染的研究中文摘要目的：1.设计并制备多条结核特异性抗原多肽ESAT-6、CFP-10和Ag85B，并从中优选出特异性较高的肽段。2.构建新型的超灵敏纳米免疫电化学传感器，探讨其用于结核感染诊断的价值。方法：1.参考文献并利用抗原表位分析软件设计多条结核特异性抗原多肽，收集189例结核病患者外周血单个核细胞（PBMC），分别用结核特异

4、性抗原多肽ESAT-6、CFP-10和Ag85B刺激PBMC培养72h，收集细胞培养上清，用ELISA法检测上清中分泌的IFN-γ水平，筛选出能刺激PBMC分泌较多IFN-γ的多肽。2.收集151例结核病患者PBMC，用ELISA法筛选出来的结核特异性抗原多肽ESAT-6、CFP-10和Ag85B单独或以不同组合方式刺激PBMC培养22h，用ELISPOT法检测斑点形成数，筛选出能刺激PBMC形成较多斑点数的多肽或多肽库。3.在磁珠表面覆盖量子点和二抗，构建以磁珠-量子点-二抗复合物为免疫探针的新型超灵敏纳米免疫电化学传感器，利用前面实验筛

5、选出来的抗原肽刺激结核病患者的PBMC分泌细胞因子IFN-γ，通过夹心免疫法和电化学中的方波溶出伏安法检测IFN-γ水平，判断结核感染。结果：1.设计并合成了10条ESAT-6多肽（编号E1-E10）、10条CFP-10多肽（编号C1-C10）以及9条Ag85B多肽（编号A1-A9）。2.通过ELISA法初步筛选出3条ESAT-6多肽（E3、E6、E9）、3条CFP-10多肽（C1、C6、C8）、3条Ag85B多肽（A2、A5、A9），通过ELISPOT法进一步筛选出不同多肽的优势组合。3.成功构建基于量子点的超灵敏电化学免疫传感器，该传感

6、器在IFN-γ浓度2+从0.01pg/mL到10ng/mL范围内，与Cd离子溶出峰电流成良好的线性关系I暨南大学硕士学位论文基于量子点的超灵敏电化学免疫传感器检测结核感染的研究2（R=0.966），在实际样品检测结果中与ELISA结果一致，有望用于临床结核感染的诊断。结论：结核特异性抗原多肽E3、E6、E9、C1、C6、C8、A2、A5、A9具有较好的特异性，其不同的组合方式构成的多肽库在刺激结核病患者PBMC分泌IFN-γ的特异性进一步提高，在IFN-γ释放试验中有重要应用价值。新型的基于量子点的超灵敏电化学免疫传感器具有灵敏度高，稳定性

7、好，响应速度快、价格低廉、操作简便等诸多优势，并且在样品实际检测中具有可行性，该纳米免疫传感系统有望用于临床结核感染的诊断以及其他病原微生物的检测和疾病的诊断。关键词：结核，ESAT-6，CFP-10，Ag85B，量子点，磁珠，方波溶出伏安法基金项目：国家“十二五”科技重大专项（编号：2012ZX10004903，2013ZX10003001）II暨南大学硕士学位论文基于量子点的超灵敏电化学免疫传感器检测结核感染的研究AbstractObjective:1.TodesignandsynthesisanumberofESAT-6,CFP-10

8、andAg85Bantigenpeptides,andtoselectseveraltuberculosisantigenpeptideswithhighspecificity.