针刺后处理对心肌缺血再灌注大鼠心脏阿片δ受体及RISK通路的调控作用研究

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1、成都中医药大学硕士学位论文(针灸推拿学院)二0一八届硕士研究生学位论文针刺后处理对心肌缺血再灌注大鼠心脏阿片δ受体及RISK通路的调控作用研究StudyonEffectsofPost-AcupunctureTreatmentonδOpioidReceptorandRISKSignalTransductionPathwayinRatswithMyocardialIschemiaReperfusion研究生姓名:宋雅兰指导教师:任玉兰学科专业:针灸推拿学二○一八年五月1成都中医药大学硕士学位论文学位论文针刺后处理

2、对心肌缺血再灌注大鼠心脏阿片δ受体及RISK通路的调控作用研究宋雅兰指导教师姓名:任玉兰教授申请学位级别:硕士专业名称:针灸推拿学论文提交时间:2018年5月论文答辩时间:2018年5月二○一八年五月2成都中医药大学硕士学位论文中文摘要目的:探讨针剌后处理调控阿片δ受体及RISK信号通路保护心肌缺血大鼠再灌注损伤的效应及机制。方法:将SPF级SD大鼠140只,随机分为空白组、模型组、再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、再灌注前后均针刺组、δ-OPR拮抗组、非经非穴组,每组20只。除空白组外,采用手术结扎并再灌注左

3、冠状动脉前降支的方法及腹腔注射ICI174864阻断阿片δ受体表达的方法,建立心肌缺血再灌注模型和拮抗阿片δ受体心肌缺血再灌注模型。造模后分别在再灌注前、再灌注后、再灌注前及后给予大鼠电针内关、神门或非经非穴治疗。通过生理记录仪、TTC染色、Tunel分别检测心电图、心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率;运用PCR及Westernblot技术检测δ-OPRmRNA及δ-OPR蛋白的表达量;并运用Luminex液相芯片技术检测Akt、Erk、JNK、p38的表达量。结果:1.Ⅱ导联心电图ST段变化与空白组相比,模型组、

4、非经非穴组、再灌注前后均针刺组、δ-OPR拮抗组的ST段抬高显著升高(P<0.01);与模型组相比,再灌注前后均针刺组、δ-OPR拮抗组的ST段抬高显著下降(P<0.01),非经非穴组略有下降,但差异不明显(P>0.05);与再灌注前后均针刺组相比,δ-OPR拮抗组、非经非穴组的ST段抬高显著升高(P<0.01)。2.心肌细胞平均凋亡率与模型组相比,再灌注前后均针刺组、δ-OPR拮抗组的心肌细胞平均凋亡率显著下降(P<0.01),非经非穴组明显下降(P<0.05);与再灌注前后均针刺组相比,δ-OPR拮抗组、

5、非经非穴组的心肌细胞平均凋亡率显著升高(P<0.01)。3.心肌梗死面积1成都中医药大学硕士学位论文与模型组相比,再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组的心肌梗死面积显著减少(P<0.01),非经非穴组略有减少,但差异不明显(P>0.05);与再灌注前后针刺组相比,δ-OPR拮抗组、非经非穴组的心肌梗死面积显著增加(P<0.01)。4.MIRI大鼠心肌阿片δ受体的表达4.1δ-OPRmRNA:与空白组相比,模型组、非经非穴组、再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、再灌注前后均针刺组的δ-OPRmRNA的表达量显著增加(

6、P<0.01);与模型组相比,再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、再灌注前后均针刺组的δ-OPRmRNA的表达量显著增加(P<0.01),非经非穴组略有减少,但差异不明显(P>0.05);与再灌注前后均针刺组相比,再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、非经非穴组的δ-OPRmRNA的表达量显著减少(P<0.01)。4.2δ-OPR蛋白:与空白组相比,模型组、非经非穴组、再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、再灌注前后均针刺组的δ-OPR蛋白的表达量显著增加(P<0.01);与模型组相比,再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、再灌注

7、前后均针刺组的δ-OPR蛋白的表达量显著增加(P<0.01),非经非穴组略有增加,但差异不明显(P>0.05);与再灌注前后均针刺组相比,再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、非经非穴组的δ-OPR蛋白的表达量显著减少(P<0.01)。5.MIRI大鼠心肌RISK通路相关蛋白的表达5.1Akt:与空白组相比,模型组、再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组、非经非穴组的Akt表达量显著下降(P<0.01);与模型组相比,再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组的Akt表达量显著增加(P<0.01),非经非穴组略有增加,但差异不

8、明显(P>0.05);与再灌注前后针刺组相比,δ-OPR拮抗组、非经非穴组的Akt表达量显著降低(P<0.01)。5.2Erk1/2:与空白组相比,模型组、再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组、非经非穴组的Erk1/2表达量显著下降(P<0.01);与模型组相比,再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组的Erk1/2表达量显著增加(P<0.01),非经非穴组略有降低,但差异不明显(P>0.05);与再灌注前

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