针刺调控慢性疲劳综合征睡眠障碍的基底前脑腺苷及其受体机制研究.pdf

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1、成都中医药大学硕士学位论文ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine（针灸推拿学院）二〇一八届硕士研究生学位论文针刺调控慢性疲劳综合征睡眠障碍的基底前脑腺苷及其受体机制研究StudyontheregulatingmechanismofacupunctureforsleepdisordersinpatientswithCFSbasedonadenosineandit’sreceptorsinthebasalforebrain研究生姓名：金红娇指导教师：吴曦教授学科专业：针灸推

2、拿学二〇一八年五月成都中医药大学硕士学位论文学位论文针刺调控慢性疲劳综合征睡眠障碍的基底前脑腺苷及其受体机制研究金红娇指导教师姓名：吴曦教授申请学位级别：硕士专业名称：针灸推拿学论文提交时间：2018年5月论文答辩时间：2018年5月二○一八年五月成都中医药大学硕士学位论文中文摘要目的：既往研究发现慢性疲劳综合征（ChronicFatigueSyndrome，CFS）患者中存在不同程度的睡眠障碍，针刺对CFS合并睡眠障碍有明显的调整作用，但其作用机制有待深入。本研究拟以CFS模型大鼠为研究载体，探索针刺对CFS睡眠障碍模

3、型大鼠睡眠障碍的影响，以及针刺对CFS睡眠障碍模型大鼠睡眠调整效应的基底前脑腺苷及其受体机制。方法：1.针刺对CFS睡眠障碍模型大鼠睡眠障碍的影响研究将30只SD大鼠按7天为1周期对其进行驯化，选取对环境适应性较好的大鼠。采用DPS处理系统将大鼠随机分为空白组（以下简称A组）、模型组（以下简称B组）、模型针刺组（以下简称C组）。B组、C组采用力竭游泳加慢性束缚方法对大鼠进行21天造模。造模结束后，A组不予任何处理；B组造模成功后第3日起开始使用自制固定装置固定大鼠，固定时间15分钟，每日一次，连续治疗5日后休息2日；C组

4、给予针刺“百会”、“神门”、“肝俞”、“肾俞”、“脾俞”、“后三里”治疗，时间频率同B组。治疗前后，采用8：00-20：00监测SD大鼠睡眠时间、睡眠地点，采用力竭游泳、高架十字迷宫实验、旷场实验、水迷宫实验检测SD大鼠行为学指标。2.针刺对CFS睡眠障碍模型大鼠睡眠调整效应的基底前脑腺苷及其受体机制研究（1）实验一、针刺对CFS睡眠障碍模型大鼠基底前脑腺苷及受体的影响研究：造模方法、分组、处理方案同前，针刺治疗后，采用ELISA检测各组大鼠基底前脑腺苷含量，采用免疫组织化学法检测基底前脑中纹状体、下丘脑腹外侧视前区A1

5、受体含量，以及纹状体、伏隔核区A2a受体含量。（2）实验二、CFS睡眠障碍模型大鼠经腹腔注射腺苷受体拮抗剂后，针刺对CFS睡眠障碍模型大鼠基底前脑腺苷及受体的影响研究：将SD大鼠按7天为1周期对其进行驯化，选取对环境适应性较好的大鼠。采用DPS软件将大鼠随机分为二甲基亚砜（dimethylsulphoxide，DMSO）组（以下简称D组）、DMSO+针刺组（以下简称E组）、A1受体拮抗剂+针刺组（以下简称F组）、A2受体1成都中医药大学硕士学位论文拮抗剂+针刺组（以下简称G组）。各组大鼠均采用力竭游泳加慢性束缚方法，复制

6、CFS动物模型。造模结束后，连续7天对D组、E组按照0.065ml/100g对大鼠腹腔注射DMSO，排除DMSO本身对大鼠的影响，F组、G组按照0.125ml/100g和0.105ml/100g对大鼠腹腔注射腺苷A1、A2A受体拮抗剂。注射7天后，D组不予任何处理；E、F、G组分别针刺“百会”、“神门”、“肝俞”、“肾俞”、“脾俞”、“后三里”治疗，治疗时间15分钟，每日一次，连续治疗5日后休息2日。治疗结束后，采用ELISA检测各组大鼠基底前脑腺苷含量，采用免疫组织化学法检测基底前脑中下丘脑腹外侧视前区A1受体含量，以

7、及纹状体、伏隔核区A2a受体含量。结果：1.针刺对CFS睡眠障碍模型大鼠睡眠障碍的影响CFS造模成功后，与A组大鼠相比，B组、C组睡眠时间显著缩短，睡眠地点明显不固定，差异均具有统计学意义（均P<0.01）。针刺治疗后，与B组相比，C组睡眠时间显著增加，睡眠地点明显固定，差异均具有统计学意义（均P<0.01）。2.针刺对CFS睡眠障碍模型大鼠睡眠调整效应的基底前脑腺苷及其受体机制（1）实验一、针刺对CFS睡眠障碍模型大鼠基底前脑腺苷及受体的影响研究：CFS造模成功后，与A组大鼠相比，B组基底前脑腺苷含量显著降低，纹状体、

8、下丘脑腹外侧视前区A1受体含量显著降低，纹状体、伏隔核区A2a受体含量含量显著降低，差异均具有统计学意义（均P<0.01）。针刺治疗后，与B组相比，C组基底前脑腺苷含量显著增高，纹状体、下丘脑腹外侧视前区A1受体含量显著增高，纹状体、伏隔核区A2a受体含量显著增高，差异均具有统计学意义（均P<0.05）。（2）实验二