呼吸道合胞病毒对结肠癌的溶瘤作用研究

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1、分类号UDC密级编号硕士学位论文呼吸道合胞病毒对结肠癌的溶瘤作用研究TheOncolyticEffectofRespiratorySyncytialVirus(RSV)inHumanColonCancer学位申请人：张伟指导教师：冯笑山教授、王公平副教授一级学科：临床医学二级学科：肿瘤学学位类别：医学硕士2015年05月独创性声明本人声明，所呈交的论文是我个人在导师指导下完成的研究工作及取得的研究成果。据我所知，文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河南科技大学或其它教育机构的其他学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同

2、志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：日期：ABSTRACT摘要目的：结肠癌作为消化道肿瘤的一种常见疾病，其发病率在所有恶行肿瘤中排名第三，且呈逐年上升趋势，发现和治疗结肠癌势在必行。RSV为单股负链RNA病毒，既往研究发现其对部分肿瘤细胞表现出溶瘤促凋亡效果，但由于同种病毒对不同组织细胞感染力和杀伤力不同，因此本研究旨在探讨RSV对结肠癌细胞是否具有溶瘤作用。方法：培养和纯化RSV并检测其滴度，MTT法检测RSV对结肠癌细胞SW480、HT29及LOVO生长抑制作用，显微镜下观察细胞病变及噬斑法测病毒滴度，AnnexinV-FITC/

3、PI双标法检测RSV对HT29细胞及SW480和LOVO细胞的凋亡诱导作用，同时结肠癌裸鼠肿瘤模型中观察瘤内接种RSV后肿瘤体积变化。结果：MTT结果提示：RSV明显抑制结肠癌细胞SW480及HT29细胞生长，这种抑制作用呈现明显的剂量及时间依赖性，对人结肠上皮细胞LOVO无抑制作用；接种病毒后SW480及HT29细胞出现不同程度的圆缩、脱落现象，随接种时间和接种剂量变化，病变愈加显著，LOVO细胞接种病毒后病变不明显；RSV病毒能够在SW480、HT29细胞中有效复制，在LOVO细胞中不能复制；AnnexinV-FITC/PI双标法结果提示：RSV可有效诱导SW480、H

4、T29凋亡，且随时间延长凋亡细胞增加，对LOVO细胞无促凋亡作用；裸鼠结肠癌模型中，与对照组比较瘤内接种RSV显示出明显的肿瘤抑制作用，统计学差异显著(P<0.05)。结论：1.RSV对结肠癌细胞SW480、HT29具有诱导促凋亡作用，对LOVO作用不显著；2.RSV能在结肠癌细胞SW480、HT29中有效复制，在LOVO中不能有效复制；3.RSV对不同细胞作用效果不同，其具体机制有待进一步探讨，提示RSV可能对多数肿瘤有杀伤作用。关键词：结肠癌；人呼吸道合胞病毒；溶瘤；凋亡论文类型：基础研究选题来源：其他IIABSTRACTABSTRACTObjective:Asacom

5、mondigestivedisease,Coloncancer,theincidencerateofwhichrankedthirdamongallmalignanttumorandithasatrendtoincreaseyearbyyear.Soitisquiteanimperativetasktodetectiveandtreatcoloncancer.RSVisasinglestrandofnegative-strandRNAvirus,ithasbeenprovedRSVhassomethingtodowiththetumorsinSolubletumoreffe

6、ct.Sincethesamevirushasthedifferentinfectivityandlethalityindifferenttissue,thearticleisaimedtoinvestigatewhethertheRSVhastheoncolyticeffectincoloncancertumor.Methods:CultureandpurifiedRSV,thendetectitstiter.MTTassaytestthegrowthinhibitingeffectthatRSVshowsinSW480、HT29andLOVOcells.Observet

7、hemorphologicalchangesofthecoloncancertumorcelleffectedbyvirusunderthemicroscopeanddetectthereproductivityofthevirusincoloncancertumorcell.AnnexinV-FITC/PIdoublestainingassaytesttheeffectthatRSVtakesintheapoptosis-inducingofSW480、HT29andLOVOcells.Meanwhile,obs