卷曲巴克斯霉原变种(backusella circina var.circina)感染小鼠的生存试验观察及致病性的动物实验研究

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1、授予单位代码10089学号或申请号20122312HebeiMedicalUniversity硕士学位论文科学学位卷曲巴克斯霉原变种(Baekusellacircinavar.circina)感染小鼠的生存试验观察及致病性的动物实验研究研究生：李静导师：万力教授专业：皮肤病与性病学二级学院：第四医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。

2、凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，实验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生签字：方御导师签章二级学院签章：M年{月妙日河北医科大学研究生学位论文独创声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注等内容外，文中不包括其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签字导师签章：知b年；月目录中文摘要…………………………………………………………………1英文摘要…………

3、………………………………………………………4英文缩写………………………………………………………………………8研究论文卷曲巴克斯霉原变种感染小鼠的生存试验观察及致病性的动物实验研究前言…………………………………………………………………9材料与方法…………………………………………………………9结果………………………………………………………………13附图………………………………………………………………16附表………………………………………………………………30讨论………………………………………………………………32结论…………

4、……………………………………………………34参考文献…………………………………………………………35综述艾滋病患者真菌感染的近况……………………………………36致谢……………………………………………………………………51个人简历………………………………………………………………52中文摘要卷曲巴克斯霉原变种(Backusellacircinavar.circina)感染小鼠的生存试验观察及致病性的动物实验研究摘要目的：巴克斯霉属Backusella属真菌门，接合菌亚门，毛霉目，广泛存在于自然界中。其中绝大多数分布在有机物、

5、土壤及动物尸体中，卷曲巴克斯霉原变种B.circinavar.circina为巴克斯霉属的其中一个变种，是一个多系类群，与放射毛霉属Actinomucor、毛霉属Mucor和根毛霉属[1]Rhizomucor有着密切的谱系关系。近年来有关巴克斯霉属感染的报道国内外逐渐增多，但目前尚无引起人体感染的文献报道。本研究所用菌株分离自我院2009年1例白血病患者面部皮损中，最初经中国科学院微生物研究所鉴定为巴克斯毛霉，现基因序列已测出，更名为卷曲巴克斯霉原变种。本实验研究通过动物实验方法，将菌悬液感染至小鼠体内，一方面通过观察小

6、鼠生存时间及死亡情况，了解该菌对小鼠致病能力的大小；另一方面，通过观察小鼠内脏大体表现、组织真菌逆培养等，观察小鼠主要脏器的感染情况。方法：1生存试验观察1.1卷曲巴克斯霉原变种系统感染动物模型的制作将我科保存的菌株常温下复苏48小时，转种于SDA培养基上27℃培养3天。采用两种方法用无菌生理盐水制备成不同浓度、不同菌丝与孢子比例的菌悬液，通过腹腔注射途径接种至不同免疫状态的小鼠。1.2死亡率的观察连续观察各组小鼠感染该菌后四周内的生存情况及自然死亡情况，记录死亡数量和死亡日期。2致病性试验观察2.1内脏感染大体观察将不

7、同时期自然死亡小鼠及观察结束后处死小鼠解剖，分别取出肝脏、心脏、肺脏、脾脏、肾脏，观察各脏器有无颜色及是否萎缩或肿大等大体改变。2.2组织真菌逆培养将各脏器在无菌条件下，通过组织研磨器研磨成1中文摘要匀浆后，挑取少许分别接种于含有沙堡氏培养基的试管中，27℃恒温箱培养一周，观察菌落生长情况，然后挑取菌落制成湿片在光学显微镜下观察菌丝及孢子形态。结果：1生存试验结果1.1小鼠感染后生存状况不同免疫状态下小鼠接种不同浓度且不含菌丝片段的菌悬液后，其精神状态、进食量及活动量无明显改变。不同免疫状态小鼠接种菌丝含量较高菌悬液时，

8、无论浓度大小，小鼠精神状态均明显变差、进食量及活动量均明显减少。不同免疫状态下小鼠接种菌丝含量较低菌悬液时，随浓度的变化各组小鼠反应均不同，其中免疫正常组小鼠在低浓度时其精神状态、进食量及活动量无明显改变。1.2接种菌丝含量相同的菌悬液其浓度越高或接种相同菌悬液浓度下的菌丝与孢子比例越高的小鼠，全部死亡所需时间越短，