利用酶法—化学氧化法偶联工艺对活性艳蓝kn-r的脱色研究

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3、单位：福连师范大学电．巧，心：、．＾、非‘皆学位授予日期：２〇迁已．乂，口年，．，，＿Ｊ；萬＇一．．．．：■‘．；‘’奇一八．＇‘二？Ｖ．－－＇。弁Ｉ＂‘＜兴２０１５年６月４之：去０‘＇ｗ、Ｊ－．＇？－．－■，？－？、．－；、，，，一＞．．．－Ｔｔ５｛／／，？，＾１卢．．，、＾了’？；ｊ／；、，‘人、、＇丫＇、、？、＇．，．；．．Ｉ；；；＇，Ｖ．．％嘶，式护记中文摘要中文摘要ＲＢＢ－本文Ｗ染料活性艳蓝（ｅｍａｚｏｌｒｒｎｉａｎｔｌｕｅＫＮＲＲＢＢＲ），利，模拟染料废水巧过水解酶原位催化制备过氧乙酸的

4、方法对其进行脱色处理，并对脱色条件进行了优化。同时，采用交联酶聚体技术对过水解酶进行固定化，并用聚己締醇进行二次包埋。最后利用固定化酶进行染料ＲＢＢＲ脱色。主要的实验结果如下：１－、过水解酶的纯化及酶学性质分析。利用亲和层析柱纯化过水解酶，ＳＤＳＰＡＧＥ一电泳显示为单条带，其分子量大小为２８ｋＤａ，比活力为９．０３Ｕ／ｍｇ。酶学性质分°°－－Ｃ．Ｃ析表明，该过水解酶最适班为６．０，最适温度为６５，在阳３０６．０及温度为３０６５’２ｈ范围内具有较好的稳定性；其Ｔｓ〇为８３．４Ｃ。２、过水解酶催化的脱色反应。利用过水解酶原位催化制备过氧乙酸对染料ＲＢＢＲ进行脱

5、色。在单因子试验的基础上，通过正交优化试验获得最优脱色条件：在５ｍＬ反应体系中，最适阳５．０、酶量２０Ｕ／Ｒｅａｃｔｉｏｎ、乙酸乙醋与过氧化氨的摩尔比４０：１、染料浓度８０ｍｇ／ｍＬ。在最优条件下处理６ｈ后，染料ＲＢＢ民的脱色率为８１．１１％２４ｈ的脱色率为９１．９６％。将体系放大５０倍后（２５０ｍＬ），２４ｈ染料贴Ｂ民，的脱色率为８４．５５％。３、过水解酶的固定化及应用效果评估。首先采用交联酶聚集体技术（ＣＬＥＡｓ）对过水解酶进行固定化，然后采用聚乙婦醇对交联过水解酶聚集体进行二次包埋，进行脱色反应。结果表明，当使用６０％（Ｖ／Ｖ）的有机溶剂Ｓ２为沉

6、淀剂，且酶与ＢＳＡ的比率为１６：２二酵的浓度为１００ｍｍｏｌ化时，交联剂戊，制备得到的过水解酶交联酶－７２乙帰醇聚体（ＰｅｒＣＬＥＡｓ）酶活回收率可达７９．％。利用不同浓度的聚（ＰＶＡ）进二－行次包埋固定化，结果发现，当ＰＶＡ浓度为１０％（ｗ／ｖ）时ＰｅｒＣＬＥＡｓ，包埋后的形态较好、酶活回收率较高，而且洗涂Ｈ次后无明显的酶活泄露。用其对染料ＲＢＢ民脱色，在维持８０％的脱色率的前提下，至少可ｔＵ进行６次循环。分别利用游离酶、－ＰｅｒＣＬＥＡｓ及包埋后的Ｐｅｒ－ＣＬＥＡｓ催化合成过氧乙酸原位氧化ＲＢＢＲ脱色，处理３０ｍｉｎ后２％、９％、．５％。，脱色率分

7、别为６３．７５．９８８３１关键词：过水解酶；过氧乙酸；脱色；活性艳盛；交联酶聚体；固定化ＩＡｂｓｔｒａｃｔＡｂｓｔｒａｃｔ－民ＲＢＢ民ｔＴｈｅ民ｅｍａｚｏｌ巧ｒｉｌｌｉａｎｔＢｌｕｅＫＮｄｅｓｏｌｕｉｏｎｗａｓｄｅｃｏｌｏｕｒｅｄｕｓｉｎａ（）ｙｇ－ｎｏｖｅｌｃｏｕｌｅｄｅｒｈｄｒｏｌａｓｅｃｈｅｍｉｃａｌｏｘｉｄａｔｉｏ打ｔｅｃｈｎｏｌｏ．Ｉ打