红芝漆酶粗酶液对活性艳蓝KN-R脱色性能的研究

红芝漆酶粗酶液对活性艳蓝KN-R脱色性能的研究

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1、衿、心幷晁界普本科生毕业论文(2009)届论文题目:红芝漆酶粗酶液对活性艳蓝KN・R脱色性能的研究学院:环境与资源学院专业:环境科学学号:200511200012姓名:李艳前言11材料与方法21.1菌种21.2主要试剂及常用储存液配法21.2.1主要试剂21.2.2常用储存液及配法21.3主要仪器设备31.4培养基1.5培养方法1.6漆酶粗酶液制备方法1.7漆酶酶活测定方法1.8活性艳蓝KN-R的脱色体系构建2结果与讨论2.1漆酶粗酶液对活性艳蓝KN・R的酶解脱色光谱分析2.2介质对脱色率的影响2.3时间对脱色率的影响2.4粗酶液用量对脱色率的影响2.5温度对脫色率的影响2.6

2、底物浓度对脱色率的影响2.7pH对脱色率的影响102.8转速对脱色率的影响112.9脱色条件的优化113主要结论12参考文献12红芝漆酶粗酶液对活性艳蓝KN-R脱色性能的研究专业:环境科学学号:200511200012学生姓名:李艳指导老师:«斌内容摘要:利用红芝(Ganodwrmalucidum)漆酶对活性艳蓝KN-R染料进行脱色研究。采用单因子试验研究了漆酶介质、酶液用量、反应时间、反应温度、反应pH、底物浓度和传速对漆酶脱色性能的影响,结果表明:漆酶脱色适宜温度为40°C,pH值为4.0,活性艳蓝染料的适宜浓度为150mg/L,粗酶液用量为4mL,反应8h可获得最大脱色率

3、,静置和振荡对脫色率影响不大;通过正交试验,确定最佳的脫色组合为:反应pH3.5,反应温度35°C,底物浓度为150mg/L,以上述最佳脱色条件对活性艳蓝进行脱色实验,反应8h,脱色率可达78%O关键词:红芝;漆酶;活性艳蓝KN-R;脱色前B染料是在水溶液或介质屮使纤维染上各种坚牢颜色的有色有机化合物。按化学结构可分为偶氮染料、蔥醍染料、靛族染料、硫化染料、瞅著染料、次甲基染料、三苯甲烷染料和杂环染料⑴。活性艳蓝KN-R(BrilliantBlueKN-R),呈蓝色粉末状,色泽接近于还原蓝RSN,是一种典型的蔥醍染料。随着染料纺织工业的迅速发展,染料的品种和数量日益增加,含染料

4、废水已成为水系污染的重点污染源Z—⑵。中国是染料生产大国,每年生产的染料达150万吨,其中50%以上用于纺织品染色,而在纺织品加工过程中,有10%-20%的染料作为废物排出⑶。常见的处理印染废水的方法主要有物理法、化学法、生物法三大类。物理法工艺简单、操作方便,但泥渣产量较大,且费用较高,所以很少单独使用。化学法在处理过程中需要投加化学药品,增加了处理费用,还可能造成二次污染,而且在能耗、设备等方面尚存在不少问题。还有一些化学方法在COD或色度等某些方面处理效果不尽人意,故化学法也很少单独运作。生物处理方法是利用微生物的代谢活性降解环境中有机污染物的方法,由于投资少、占地少,不

5、需要特殊设备而倍受青睐⑷。漆酶(Laccase,p-benzenediol:oxygenoxidoreductase,E.C」」0.3.2)是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族屮的一小族⑸,对多种芳香族染料具有降解作用,采用漆酶对染料进行脱色降解的研究已引起了国内外的广泛关注⑹。漆酶对印染废水有较高的脱色率,大大降低其它方法处理印染废水时对环境的污染。除此之外,在环境、食品、降解木质素、植物纤维的改性、牛物传感器、染整工艺、饮料加工、有毒化合物的生物消除、生物检测、纸浆漂白、有机污染物处理、痕量物质的分析等诸多现代工业领域中,漆酶都有着巨大的潜在应用价值79]。本文以活性

6、艳蓝KN-R染料为对象,用红芝漆酶粗酶液对其进行脱色降解处理,以其最大吸收波长592nm处的吸光值变化为指标,表征染料脫色降解,考察漆酶介质、脱色反应时间、漆酶粗酶液用量、脱色反应温度、脱色底物浓度、脱色反应pH值、摇床转速等因素对脱色性能的影响,并通过止交实验确定脱色的最佳条件。1材料与方法1.1菌种红芝(Ganodermalucidum),实骑室保藏菌种。1.2主要试剂及常用储存液1.2.1主要试剂活性艳蓝、柠檬酸、磷酸氢二钠、愈创木酚、对瓮基苯甲酸、1,2,3-三轻基苯并三卩坐、8-耗基嗪II林、氯化症胺、紫尿酸鞍、丁二酸、氢氧化钠,均为国产分析纯试剂。1.2.2常用储存

7、液(1)柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液(pH2.6-7.0)A液:0」mol/L柠檬酸溶液,称取21.01g柠檬酸,定容至1L。B液:0.2mol/L磷酸氢二钠溶液,称取53.7g磷酸氢二钠,定容至1L。按照表1量取不同体积的A液和B液混合,用pH计调节至所需值。(2)丁二酸-氢氧化钠缓冲液(pH3.8-6.0)A液:0.2mol/LT二酸溶液,称取丁二酸23.62g,定容至1L。B液:0.2mol/L氢氧化钠溶液,称取氢氧化钠8.00g,定容至1L。取A液25mL,B液20mL混合,用pH计将

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