利用多倍体诱导和转基因技术创制芦笋新种质的研究

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1、学校代码：学号：分类号：密级綠大營硕士学位论文题目利用多倍体诱导和转基因技术创制芦笋新种质的研究作者鹿志伟指导教师易克贤研究员高建明副研究员专业农业生物技术时间：二一五年五月StudyoncreatingnewasparagusgermplasmusingpolyploidinductionandtransgenictechnologyAThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementFortheMasterDegreeinAgronomyByZhiweiLuSupervisor:KexianYiMajor:Agricult

2、uralBiotechnologySubmittedtime:May,2015海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研宄工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。学位论文版权使用授权说明本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可以为存在馆际合作关系兄弟

3、髙校用户提供文献传递服务和交换服务。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密论文在解密后遵守此规定。本人已经认真阅读“高校学位论文全文数据库发布章程”，同意将本人的学位论文提交“高校学位论文全文数据库”中全文发布，并可按“章程”中规定享受相关权益。同意论文提交后滞后：口半年：口一年：年发布。摘要芦笋是世界十大名贵蔬菜之一，含有多种活性药用成分以及其它重要的营养成分，素有“蔬菜之王”的美誉。然而随着芦笋种植面积的不断增加，病害、低产等问题也随之出现，严重制约着芦笋产业的长期稳定发展。因此培

4、育抗病、高产的芦笋新品种成为当务之急。本研宄针对芦笋抗病、高产的新品种培育的需要，利用多倍体诱导和转基因技术进行了芦笋新种质的研宄。主要研宄结果如下：芦笋多倍体诱导工作中，以“新王朝”和“达宝利”两个芦笋品种的露白种子作为诱导处理对象，以秋水仙素（添加处理浓度和处理时间作为诱导因子，设计多个梯度的正交试验，研宄其对芦笋四倍体诱导率的影响，结果发现最佳的秋水仙素处理组合为：的秋水仙素（添加处理，诱导率高达。经过流式细胞仪和染色体计数法两种方法对四倍体进行鉴定后，发现二倍体芦笋的染色体数目为条，而四倍体染色体数目为条；流式细胞仪鉴定结果中，二倍体植株的荧光强度主吸收峰值为四倍体的二

5、分之一；形态学、细胞学和叶绿素含量水平的对比发现，与二倍体相比，四倍体芦笋植株粗壮、叶片长度和直径增加，气孔细胞密度减少，气孔细胞体积增大，叶绿体数目和叶绿体含量增加。以“井岗”芦夢无菌苗作为研宄对象，种不同浓度的植物激素作为诱导因子，设计了一系列的正交试验，最后通过软件进行结果方差分析，确定了最佳诱导芦笋愈伤组织、胚状体以及芦笋组培苗的激素浓度组合：最佳的芦笋愈伤组织诱导培养基为，蔗糖卡拉胶；最佳的芦笋胚状体诱导培养基为鹿糖谷氨酰胺酸水解酪素喃腔醇卡拉胶；最佳的声夢组培苗诱导培养基为蔗糖卡拉胶。成苗率达到左右。室外移栽成活率高达。开展了芦笋遗传转化体系建立的研宄，成功构建了含

6、有基因的植物表达载体，并转入农杆菌菌株中。并以“井岗”芦笋胚状体作为侵染对象，研究了最佳的农杆菌转化芦笋胚状体的最佳条件，结果为：预培养，菌液浓度侵染时间共培养时间，浓度，对转化芦笋苗进行检测，阳性率为。关键词：芦笋；组培；多倍体；转基因；诱导AbstractAsparagusisoneoftheworld’，，，，，，，，，transplantingsurvivalratewereupto90%.3.Intransgenicbreeding,theplantexpressionvectorpCAMBIA3300withhevein-likegenewassuccessfull

7、yconstructedandwastransferredintoAgrobacteriumtumefaciensstrainEHA105.Asparagusembryoidswereselectedasinfestedobjects.TheoptimumAgrobacterium-mediatedtransformationconditionsforasparagusembryoidwere:pre-culturefor2d，，，，目录？芦笋概况生物学特性食用价值药用价值植物多倍体诱变研究