不同产羔性状绵羊的生殖激素和bmpr-ib、gdf9及rxrg基因研究

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1、分类号密级UDC单位代码10733甘肃农业大学博士学位论文不同产羔性状绵羊的生殖激素和BMPR-IB、GDF9及RXRG基因研究StudyonBMPR-IB,GDF9,RXRGGenesandReproductiveHormonesforLambingTraitsinThreeSheepBreeds王静指导教师姓名张利平教授（甘肃农业大学兰州730070）学科专业名称动物遗传育种与繁殖研究方向动物遗传理论与应用论文答辩日期2015年5月29日学位授予日期2015年6月答辩委员会主席田可川研究员评阅人陈斌教授张红平教授吕丽华教授2015年6月甘肃农业大学2015届博

2、士学位论文StudyonBMPR-IB,GDF9,RXRGgenesandreproductivehormonesforlambingtraitsinthreesheepbreedsByWangJingSupervisor:Prof.Liping-ZhangADissertationSubmittedtoGansuAgriculturalUniversityforTheDegreeofPh.DofAnimalGeneticsandBreedingCompletedinJune2015CommencementinSeptember2012甘肃农业大学2015届博士学

3、位论文项目资助通过蛋白表达差异与动态组成研究绵羊双羔性状的信号分子及其调控机理（31260547）绵羊双羔性状分子调控机理研究（GNSW-2012～24）中华人民共和国国家外国专家局文教类高端外国专家项目（GDT20156200086）甘肃农业大学2015届博士学位论文不同产羔性状绵羊的生殖激素和BMPR-IB、GDF9及RXRG基因研究摘要产羔性状是绵羊生产中重要的经济性状之一，双羔因其高成活率和良好的羔羊体况，一度被视为绵羊生产中理想的产羔性状。双羔率的提高直接关系到绵羊养殖业的生产成本和生产效率。然而，双羔性状的遗传基础及机理尚不清楚，为了筛选有效的双羔性状

4、分子标记，探索绵羊产羔性状的遗传机理。本研究以蒙古羊（单胎母羊和双胎母羊）、无角陶赛特羊（单胎母羊和双胎母羊）和小尾寒羊（多胎母羊）为试验动物，研究不同产羔性状的3个绵羊品种在繁殖周期不同时期（乏情期、发情周期第1d、发情周期第11d）：1）外周血液中生殖激素的差异；2）卵巢和性腺轴上各组织中BMPR-IB、GDF9和RXRG3个基因mRNA表达水平及其变化规律；3）卵巢组织中的BMPR-IB、GDF9和RXRG蛋白表达差异；并检测和分析3个绵羊品种的BMPR-IB、GDF9和RXRG3个基因单核苷酸多态性（SNPs）及其与产羔性状的相关性。主要取得以下研究结果：

5、（1）3个绵羊品种7种繁殖激素分泌各具特征，无角陶赛特羊母羊3个时期所有激素浓度均高于蒙古羊母羊。除FSH和T品种间，MT和PRL在蒙古羊单、双羔间出现了差异外，其余激素分泌模式基本一致；乏情期PRL、MT、LH和FSH的分泌水平从单羔、双羔到多羔母羊间呈递增性分泌，且差异显著（P＜0.05）。在发情期第1d，各激素分泌水平和产羔性状关系没有在品种间呈现一定的规律，但在品种内有一定的相关和相似性。双羔蒙古羊母羊的PRL，LH，PROG和FSH分泌水平均显著高于蒙古羊单羔母羊，但MT显著低于单羔母羊；无角陶赛特羊双羔母羊的PROG分泌水平显著高于无角陶赛特羊单羔母羊

6、，但T显著低于单羔母羊。在发情周期第11d，蒙古羊双羔母羊的LH、PROG和FSH分泌水平均显著高于蒙古羊单羔母羊，而T显著低于单羔母羊；无角陶赛特羊双羔母羊的PRL分泌也显著高于无角陶赛特羊单羔母羊。（2）3个绵羊品种不同繁殖状态下各候选基因表达规律表明：蒙古羊和无角陶赛特羊在乏情期GDF9和RXRG基因mRNA表达规律相同（卵巢＞垂体＞下丘脑），但和BMPR-IB基因的不同。小尾寒羊3个候选基因有其特异的相同模式。而在发情期第1d和第11d均表现出不同的表达模式；表达量和产羔性状I甘肃农业大学2015届博士学位论文的相关性分析表明：BMPR-IB基因在乏情期蒙

7、古羊和无角陶赛特羊的垂体、无角陶赛特羊下丘脑和蒙古羊卵巢，以及发情期第1d蒙古羊和无角陶赛特羊垂体，双羔母羊的表达量均大于单羔母羊；GDF9基因表达量在乏情期垂体和下丘脑均是单羔母羊大于双羔母羊，但卵巢上不同品种表达量不一致；蒙古羊RXRG基因表达量除乏情期卵巢双羔母羊大于单羔母羊外，其余各时期均是单羔母羊大于双羔母羊，而无角陶赛特羊RXRG基因在发情周期第1d卵巢和垂体、发情周期第11d卵巢均是双羔母羊大于单羔母羊。（3）基于差异蛋白电泳分离技术，结合质谱结果，研究发现卵巢BMPR-IB蛋白表达量在乏情期、发情周期第1d及11d，除乏情期蒙古羊单羔未检测到外，3

8、个品种中其