rsv来源的vsirna调控水稻内源基因表达的研究

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1、：：分类号单位代码密级：学号：１２７２００４９学位论文脱Ｖ来源的ＶＳｉＲＮＡ调控水稻内源基因表达的硏究Ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｇｅｎｅｒｅｇｕｌａ化ｄｂｙＲＳＶ－ＡｄｅｒｉｖｅｄｖｓｉＲＮ研究生：．施冰斌指导教少巧；陈剑平研究员燕飞研究员申请学位口类级别：农学硕壬：植物病理学专业名称研究方向：分子植物病毒所在学院：梢物保护学院答辩娶员会主席：二零一五年六月独创性声明本人

2、声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，。尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。、研究生签名：無灰或时间：火Ｋ年ｔ月日）关于论文使用授权的说明本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，目Ｐ：学校有权、保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被签阅和借阅，可

3、采巧影印缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。（研保密的学位论文在解密后应遵守此协议）究生签名；施瓜論、时间：＞皮年（月＾日一■第导师签名；时间：年《月？日ADissertationfortheDegreeofMasterTheexpressionofendogenousgeneregulatedbyRSV-derivedvsiRNAByShiBingbinSupervisedbyAacdemicianChenJi

4、anpingandResearcherYanFeiAnhuiAgriculturalUniversityHefei230036,P.R.ChinaJune,2015摘要RSV能够引起水稻条纹叶枯病，该病于我国多个稻区多次爆发，造成了极大的经济损失。RSV作为纤细病毒属(Tenuivirus)的代表种，主要由灰飞虱传毒并通过卵以持久性方式四散传播，其基因组由4条负义RNA链组成，共编码至少7个不同功能的蛋白。近年来，关于RSV各开放阅读框编码的蛋白质功能研究已取得一定的进展，而关于RSV与寄主之间的相互关系的研究尚不深入。

5、本研究在前期工作基础上，证实RSV侵染导致水稻和本氏烟一条内源基因（T1）的表达下调。利用病毒诱导的基因沉默技术研究发现，内源T1基因的沉默导致本氏烟出现叶片皱缩和植株矮缩的表型，这些表型与RSV侵染本氏烟导致叶片皱缩和植株矮缩的症状相一致，说明T1基因的表达下调参与了RSV的症状表现。通过序列分析我们发现，T1基因编码区与RSVRNA4上存在序列互补的情况；深度测序发现RSV在侵染本氏烟过程中的确从此RNA4区域产生了大量的vsiRNA；进一步利用人工miRNA技术分析发现，该vsiRNA能够靶向作用于T1基因，导致T

6、1基因mRNA被切割降解，并通过RACE方法确定了vsiRNA在T1mRNA上的切割位点。对超表达T1基因的本氏烟植株接种RSV发现，T1基因的超表达弥补了vsiRNA导致的T1积累量下调，缓解了症状的表现，进一步证明vsiRNA靶向作用于T1基因，通过下调T1基因导致RSV的叶片皱缩和植株矮缩症状。关键词：RSV，内源基因，病毒来源的siRNA，超表达T1基因IAbstractRicestripevirusisthetypememberofgenusTenuivirus,transmittedinacirculativ

7、epersistentmannerbythesmallbrownplanthopper,Laodelphaxstriatellus(SBPH).RSVhasfoursinglestrandedRNAsegments,encodedatleastsevenproteinswithdifferentfunctions.Inrecentyears,therearesignificantprograssaboutfunctionofproteinsencodedbyopenreadingframesofRSVgenome,whe

8、reasthestudyontherelationshipbetweenRSVandhostislimited.Onthepreviouswork,wehavefoundthatRSVinfectioncoulddownregulateoneendogenousgene,namedT1,inbothriceandN.