resistin与肥胖性2型糖尿病恒河猴模型相关性及其参与病理发生的分子机制研究

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1、－一．＇Ｖ■一１．＇＇芒ｒ：，Ｖ；／，？＇－．－＇；子－－．？．ｉＶ．：．．＼．，；７—－：百’．‘’．Ｖ占ｉ＇＇．？．＞Ｖ？．ｓ＇■输抑巧完．，－ｒ－－二．，ｉｖ寸瞧衫片：一ｖ资＾叫：？■Ｖ一Ｖ护户＇．－．一：马．Ｖｒ＇Ｔ．；．ｒ．－Ｖ；Ｊ‘■ｖｊ立－硕＾究生文／Ｊ：ｖ．■／早：妃一’－：：：，；：．。＇Ｉ／Ｍ＇－一｜Ｖ＼ＨＩ北娜嫌Ｉ生院－：＇．．Ｉ．＇；

2、学校代码：１００２３学号：Ｓ２０１２０Ｉ８００２硕：ｔ学位论文Ｒｅｓｉｓｔｉｎ与肥胖性２型糖尿病恒巧猴模型相关性及其参与病理发生的分子机制研究ＴｈｅＣｏｒｒｅｌａｔｉｏｎａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＭｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆＰａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆＲｅｓｉｓｔｉｎｉｎＯｂｅｓｅＴｙｐｅ２ＤｉａｂｅｔｅｓＲｈｅｓｕｓＭｏｎｋｅｙＭｏｄｅｌｓ所院：医学生物学研究所姓名：乞素冬指导教师；和占龙副研巧员导师小组：鲁帅尧副主任技师学科专业：动物学研究方向：糖尿病相关基因及功能研究完

3、成日期：２０１５年５月中国医学科学院／北京协和医学院医学生物学研究所硕±学位论文目录摘要１Ａｂｓｔａｃｔ２刖胃４一ｅｎ与第部分血清Ｒｓｉｓｔｉ肥胖性Ｔ２ＤＭ恒河猴模型的相关性分析７一、肥胖性Ｔ２ＤＭ恒河猴模型的构建７１实验材料７１．１实验动物７１２．饲料配方７１．３试剂与耗材８８１．４仪器设备２实验方法８２．１高糖高脂饮食诱导恒河猴高脂血症和肥胖症８９２．２低剂量ＳＴＺ诱发肥胖性Ｔ２ＤＭ恒河猴模型及评价２．３组织病理学检测１０３结果１１３．１体重、血

4、脂、空腹血糖、膜岛素、Ｃ狀及族岛素抵抗指数临床指１标监测结果１３１１．２葡萄糖耐量试验和膜岛素耐受试验５３１．３尿糖的定性检测３．４Ｔ２ＤＭ膜岛素抵抗相关细胞因子Ｒｅｓｉｓｔｉｎ检测化３１６．５膜腺、肝脏和肾脏的组织病理学分析３１８．６膜岛组织病理学分析３１８．７肝脏组织糖原染色分析结果树论１９二、血清Ｒｅｓｉｓｔｉｎ与肥胖性Ｔ２ＤＭ临床指标的相关性分析及其在糖代谢中的释放特征２０１实验材料２００１．１实验动物２１１．２试剂与耗材２２１．３仪器设备１２２实验方法１

5、１中国医学科学院／北京协和医学院医学生物学硏究所硕±学位论文２．１诱导Ｔ２ＤＭ模型２１２．２血清Ｒｅｓｉｓｔｉｎ与Ｔ２ＤＭ恒河猴模型的血脂、血糖、糖化血红蛋白、膜岛素、膜岛素抵抗指数和细胞功能的相关性分析２２Ｐ２血清Ｒｅｓｉｓ化在Ｔ２ＤＭ恒河猴模型葡萄糖代谢过程中的变化．３．．．．．．２２３结果２２３．１Ｔ２ＤＭ猴血脂、血糖、糖化血纽蛋白、膜岛素等指标检测结果．．２２３．２血清Ｒｅｓｉｓｔｉｎ与Ｔ２ＤＭ恒河猴模型的血脂、血糖、糖化血红蛋白、族岛素、膀岛素抵抗指数和Ｐ细胞功能的相关性分析结果２３３．３

6、葡萄糖耐量试验２５３．４在葡糖糖耐量试验中对血糖、膀岛素和Ｒｅｓｉｓｔｉｎ释放的变化曲线ＡＵＣ计算结果２５３．５对照组与Ｔ２ＤＭ组的组内比较２５论２８ｅ‘第二部分恒河猴Ｒｓｉｓｔｉｎ基因的克隆与慢病毒载体的构建３０一ｅ、恒河猴Ｒｓｉｓｔｉｎ基因克隆及分析３０１实验材料３０１．１实验动物３０‘１．２试剂与耗材３０？１．３仪器设备３１２实验方法３１２１．引物设计与合成３１２２．总ＲＮＡ的提取３１２．３ＣＤＮＡ的合成３２２．４恒河猴Ｒｅｓｉｓｔｉｎ基因的扩增

7、３２２．５胶回收ＰＣＲ产物３３２．６酶切，连接和转化３４２．７提取质粒３５２．８双酶切鉴定３５２．９测序及序列分析３５３结果３５３．１脂肪姐织和膜腺组织总ＲＮＡ抽提及检测结果３５３．２Ｒｅｓｉｓｔｉｎ基因的ＰＣＲ扩增结果％３．３Ｒｅｓｉｓｔｉｎ基因克隆及鉴定结果３６３．４测序及序列分析结果３８２中国医学科学院／北京协和医学院医学生物学硏究所硕±学位论文■二、恒河猴Ｒｅｓｉｓｔｉｎ重组慢病毒载体的构建及包装４０１４０实验材料１．１质粒、菌株及细胞４０１．２

8、试剂与耗材４０１．３仪器设备４０１４ＰＣ民４１．引物设计