mir-16调节小鼠腹腔巨噬细胞极化及其对cd4~+t细胞功能的影响

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2、姓名；硕去学科专业名称；病理学与病理生理学＿申请学位级别；；２０１５年６月１弓０１５年５月论文答辩日期论文提交日期：２ｊ２０１５年６月３０曰堂仿暢予单仿：扬州大学学你巧予日期；＿＿＇巧振卿教授，；＞答辩委员会主席；ｉｐ／／Ｖ／■／？－？＇＇、国家自然科学基金面上项目（ＮＯ：８１２７３２１４）Ｖ＼＇Ｏ）＇江苏省普通髙校研究生科研创新计划项目（Ｎ：ＣＸＬＸ１３９２４义ｉ－心．．‘１．．＇．七Ｖ－．＊成＇’峡２０。年５月、如ｈ戶巧三％主，‘｜‘＾側娛誇扛￥乃；巧！＇—‘’树‘满飞＇？心．＾

3、、心．成、／ｍ－缪俊俊ｉＲ１６调节小鼠腹腔巨蹈细胞极化及其对Ｔ细胞功能的影响Ｉ＋ｍ－ｉＲ１６调节小鼠腹腔巨禮细胞极化及其对ＣＤ４Ｔ细胞功能的影口向中文摘要目的：＋－６Ｍ２ＣＤ４Ｔ细胞本研究拟探讨ｍｉＲ１对小鼠腹腔巨隧细胞１／Ｍ极化的调控作用及其对功能的影响，为抗肿瘤免疫治疗提供新的潜在干预鞭点。方法；ｍ化－１．１６对小鼠腹腔巨唆细胞极化的调节作用１１－．ＷｌＯＯｎ／ｍｌＩＦＮＹ及２０ｎｇ／ｍｌＬＰＳ刺激Ｃ５７ＢＬ／６小鼠腹腔来源巨隨细胞４化将ｇ／ｍ－４其诱导成Ｍｌ型巨睡细胞模型，Ｗ２０ｎｇｌ正刺激Ｃ５７ＢＬ

4、／６小鼠腹腔来源巨隧细胞４化－将其诱导成Ｍ２型巨倦细胞模型。我们选取了ＣＤ１６／３２、正１２和ｉＮＯＳ作为Ｍｌ型巨随细－Ｄ２０６Ｄｅｃ－胞的标记物，Ｃ，ｔｉｎ１和忙１０作为Ｍ２型巨旌细胞的标记物，利用流式细胞仪检测巨隨细胞ＣＤｅｃ－１６／３２、ＣＤ２０６和Ｄｔｉｎ１的表达，ＥＬＩＳＡ法检测腹腔巨隨细胞培养上清中ＥＬ－－１０和化１２的浓度，Ｇｒｉｅｓｓ法测定小鼠腹腔巨峰细胞ｉＮＯＳ的活性水平，Ｗ验证两型巨噓细胞的成功获得。－１．２我们用慢病毒感染小鼠腹腔原代巨帷细胞和正４诱导形成的Ｍ２型巨懂细胞，使－－其过表达ｍｉＲ１６，分别用流式细胞仪检测腹腔巨隨

5、细胞ＣＤ１６／３２、ＣＤ２０６和Ｄｅｃｔｉｎ１的表－ＥＬＩＳＡ法检测腹腔巨隨细胞培养上清中正－达１０１２ｅ法测定腹腔巨峰，和圧的分泌，Ｇｒｉｓｓ－细胞ｉＮＯＳ的活性水平，Ｗ探究ｍｉＲ１６对小鼠腹腔巨嗦细胞的表型和功能的影响。＋２－．ｍｉＲ１６影响Ｍ２型巨隨细胞极化后对ＣＤ４Ｔ细胞功能的影响及其可能机制＋２．１采用Ｍ２型巨隨细胞与ＣＤ４Ｔ淋己细胞体外共培养的方法，流式细胞术检测Ｔ细－２和－胞表面早期活化标志£０做的表达，ＥＬＩＳＡ检测细胞培养上清中正ＩＦＮｙ的分泌，＋－２型ＣＤ４Ｔ。研究ｍｉＲ１６影响Ｍ巨懂细胞表型和功能后对淋己细胞功能的影响－２．２

6、利用Ｍｉｒｂａｓｅ、Ｔａｒｅｔｓｃａｎｓ、ＰｉｃＴａｒ等基因预测软件查找ｍ化１６ｇ可能的潜在靴基因，－Ｗ探索ｍｉＲ１６影响Ｍ２型巨随细胞极化的可能机制。－－２．３将慢病毒介导的ｍｉＲ１６导入比４诱导形成的Ｍ２型巨嗦细胞使其过表法扬州大学硕±学位论文２－－－ｍ－ｅｓｅｌｉＲ１６，利用ＷｔｒｎＢｏｔ检测ＰＤＬ１蛋白的表法情况，Ｗ验证ｍｉＲ１６是否通过调控ＰＤＬ１蛋白的表达而影响腹腔巨嗟细胞的极化。结果；－１．体外实验表明，ｍｉＲ１６促进Ｍｌ型巨唆细胞的极化，抑制Ｍ２型巨随细胞的极化。－１．１经ＩＦＮＹ和ＬＰＳ处理的小鼠腹腔巨唆细胞ＣＤ１６／３２表

7、达上调，心１２产生明显增力口－，ｉＮＯＳ的活性水平増加，符合Ｍｌ型巨唆细胞的特点；经正４处理的小鼠腹腔巨隨细－０６ｅｃ－ｎ胞ＣＤ２和Ｄｔｉｎ１表达上调，比１０产生明显増加，符合Ｍ２型巨签细胞特点。ｍ－Ｄ２０６１．２慢病毒介导的ｉＲ１６感染小鼠腹腔原代巨随细胞后，ＣＤ１６／３２表达增加，Ｃｅｃ－达无明显变化－￣和Ｄｔｉｎ１表，ｉＮＯＳ的活性水平增加，比１２分泌増加，正１０变化不明显，表现出类似Ｍｌ型巨嗤细胞的特点。－－１１．３慢病毒介导的ｍｉＲ６感染正４诱导