dan条形码在小食心虫属鉴定中的应用研究

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1、分类号Ｓ７６３学号２０１謂霸＾巧裘老大聲全曰制硕±学位论文Ｈｉ‘転连ＤＡＮ条形码在小食心虫属鉴定中的应用研究姓名；李明靖指导教师：张志伟副教授学科专业：森林保护学培养单位：林学院中国？山西？太谷二〇—五年六月ＳｈａｎｘｉＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙ－ｔＦｕｌｌｉｍｅＭａｓｔ：ｅｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｇＳｔｕｄｉｅｓｏｎＣｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＧｒａｐｈｏｌｉｔａｂａｓｅ

2、ｄｏｎＤＮＡＢａｒｃｏｄｉｎｇＮａｍｅ：ＭｉｎｇｊｉｎｇＬｉＡｄｖｉｓｅｒ：Ａｓｓｏｃｉａ化Ｐｒｏｆ．ＺｈｉｗｅｉＺｈａｎｇＭａｏｒ：ＦｏｒｅｓｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎｊＴｒａｉｎｉｎＵｎｉｔｓ：ＣｏｌｌｅｅｏｆＦｏｒｅｓｔｒｇｇｙＴａｉｇｕＳｈａｎｘｉＣｈｉｎａｔＪｕｎｅ，２０１５学位论文原创性声明本人郑重声明，是在导师指导下，独立进行：所提交的学位论文研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果

3、。对本文研究做出过重要贡献的个人和集体，均已在文中ｋ义明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。￣作者签違（亲笔）年１。：訓蜂７＾５月（１学位论文版权使用授化书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定。即学位论文的知识产权属山西农业大学；同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的原件、复印件和电子版允许论文被查阅和借；阅；本人授权山西农业大学可从将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇，可编学位论文。作者签；Ｍ

4、亲笔）：寺幸ＷＳ年月；曰Ｉ）导师签違（亲笔）：哀年备月／Ｉ曰冰命国家自然科学基金项目３１４０２００７国家公益性行业（巧业）科研专项２０１１０３０２４目录摘要１１引胃３１丄小食也虫概述３１丄１小食也虫属０邸Ａｏ化ａＴｒｅｉｔｓｃｈｋｅ１８２９３，１．１．２小食也虫的形态特征３１丄３在农业防治中发现的问题４１丄４传统分类鉴定４１．２．昆虫分子分类技术研究进展５１．２．１昆虫分子分类技术的发展历程５１．２．２基因标记５１．３．ＤＮＡ条形码７１

5、．３．１ＤＮＡ条形码概述７１．３．２ＤＮＡ条形码发展历程７１．３ＤＮＡ条形码．３存在的问题７１．３．４ＤＮＡ条形码在鱗翅目昆虫中的应用８１９．４．研究内容与目标１．４．１小食也虫分类的步骤及存在的问题９１．４．２目的及意义９１．４．３技术路线１０２材料与方法１２２丄实验材料口２丄１供试虫源１２２丄２ＤＮＡ提取、扩増、电泳主要试剂和仪器１３２．２．实验方法１４２．２．１小食也虫物种鉴定１４２．２．２基因组提取（ＣＴＡＢ提取法）１５２

6、１．２．３基因组ＤＮＡ检测６２．２．４ＰＣ民扩增１６２７．２．５ＰＣＲ产物检測１Ｉ２．２．６ＰＣＲ产物的测序１７２．３序列分析１７３基于不同性别与虫态的小食也虫ＣＯＩ基因序列差异１８３丄材料与方法１８３丄１实验材料１８３丄２实验方法１８３．２．结果与分析１８３．２．１梨小食也虫与麻小食也虫的形态学检测１８３．２．２梨小食也虫与麻小食也虫的基因信息１９３．２．３不同性别ＣＯＩ序列分析１９３．２．４不同虫态ＣＯＩ序列分析２３３．３．Ｗ论２８３

7、．３．１ＣＯＩ碱基組成２８３．３．２遗传距离２９３．４．３０４不同地理种群梨小食也虫线粒体ＣＯＩ基因序列差异３１４丄材料与方法３１４丄１实验材料３１４丄２实验方法３１４．２．结果与分析３１４．２．１梨小食也虫不同地理种群的基因信息３１．．２４２梨小食屯不同地理种群ＣＯＩ序列分析３１４．３．龍３３１４．３．ＧｅｎＢ地ｋ与实验所得不同地域梨小食也ＣＯ３４Ｉ序列分析４．４．结论３８５北方主要小食必虫属昆虫ＤＮＡ条形码研究３９５．１材料与方法３９

8、５丄１实验材料３９５丄２实验方法３９５．２．实验结果与分析３９５．．２１四种小食也虫的形态学检测３９５．２．２北方主要小食也虫属屋虫的基因信息４０５．２．３小食也不同物种ＣＯＩ序列分析４１５．２．３３系统发育树