黄芪穴位注射及其与激素联合使用对哮喘大鼠p38 mapk通路和细胞因子的影响

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1、暨南大学硕士学位论文黄芪穴位注射及其与激素联合使用对哮喘大鼠P38MAPK通路和细胞因子的影响TheeffectsofAstragalusmembranaceuspointinjectionandcombinedwithdexamethasoneonP38MAPKsignalpathwayandcytokinesofasthmaticrats作者姓名：许俐娴指导教师姓名：潘海燕学位、职称：硕士学位、主任医师学科、专业名称：临床医学硕士（内科学）学位类型：专业学位论文提交日期：2015年5月20日论文答辩日期：2015年6月5日答辩委员会主席：陈鹏飞教授论文评阅人：盲审学位授予单位和日期：

2、暨南大学2015年6月28日暨南大学硕士学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得暨南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解暨南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权暨南大学可以将学位论文的全部或部分

3、内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：签字日期：签字日期：学位论文作者毕业后去向：工作单位：电话：通讯地址：邮编：暨南大学硕士学位论文黄芪穴位注射及其与激素联合使用对哮喘大鼠P38MAPK通路和细胞因子的影响中文摘要目的在前期研究的基础上进一步研究黄芪穴位注射对p38MAPK通路的影响，探讨黄芪穴位注射对哮喘的治疗效应及可能的作用机制，并初步探讨黄芪穴位注射与地塞米松联合用药对哮喘大鼠的治疗效果是否存在协同作用，为临床推广应用提供实验依据。方法将SPF级SD大鼠随机分为6组，即正常组（A组

4、）、哮喘模型组（B组）、盐水穴位注射组（C组）、SB203580干预组（D组）、黄芪注射液穴位注射组(E组)及黄芪注射液穴位注射+地塞米松联合治疗组(F组)，每组8只。经卵清白蛋白（OVA）+氢氧化铝AL(OH)3混合液腹腔注射致敏和激发（1%OVA溶液雾化30min）建立哮喘模型。各组大鼠末次激发24小时后（实验第29天）处死，取血清、肺泡灌洗液(BALF)及双肺组织。左肺组织经固定后作石蜡切片，行HE和免疫组化染色，分别观察肺组织病理学改变和软件处理分析磷酸化p38MAPK核阳性细胞平均灰度值,右肺组织提取蛋白，经蛋白印记法（Westernblot）检测大鼠肺组织磷酸化p38MAPK

5、蛋白的表达；酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定血清和肺泡灌洗液（BALF）上清液中白介素4（IL-4）、干扰素γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-a）浓度。结果1.大鼠异常行为情况：哮喘组（B组）大鼠经激发后逐渐出现呼吸急促、口唇发绀、烦躁不安、频繁挠鼻、腹肌痉挛、毛色光泽减退等哮喘典型症状和体征，正常组（A组）大鼠活动正常，无上述异常表现，盐水穴位注射组（C组）大鼠与B组比较呼吸急促等症状和体征相似，SB203580干预组（D组）、黄芪穴位注射组（E组）、黄芪穴位注射+地塞米松联合治疗组（F组）大鼠与B组比较症状和体征减轻，其中D组减轻最明显。2.肺组织HE染色观察：B组和C

6、组大鼠肺组织结构破坏严重，支气管管腔狭窄，支气管上皮细胞脱落，平滑肌束增生肥大，支气管管壁、管腔及血管周围I暨南大学硕士学位论文可见大量炎症细胞浸润等病理组织学改变，A组大鼠肺组织无上述改变，D组、E组、F组与B组相比不同程度减轻，以D组减轻最为明显，E组和F组减轻程度相当。3.Westernblot检测磷酸化P38MAPK结果：B组磷酸化P38MAPK表达水平最高，A组表达水平最低；差异具有显著性意义（P<0.05），E组与C组比较表达水平降低，差异显著（P<0.05），E组与D组比较表达水平升高，差异显著（P<0.05），E组与F组比较表达水平相当，差异无显著性意义，（P>0.05）

7、。4.ELISA检测血清和BALFIL-4、IFN-γ、TNF-a水平：A组血清和BALF中IFN-γ水平最高，IL-4、TNF-a水平最低，B组血清和BALF中IL-4、TNF-a水平最高，IFN-γ水平最低，差异显著（p<0.05）；E组与C组比较：血清和BALF中IL-4、TNF-α水平降低，IFN-γ水平升高，差异显著（P<0.05），E组与D组比较：血清和BALF中IL-4、TNF-α水平升高，IFN-γ水平降低，差异显著