鸡vdac1、vdac2和mospd1基因在前等级卵泡中的时空表达及vdac基因与产蛋性状的关联

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1、分类号：S831.2单位代码：10193密级：公开学号：2012576硕士学位论文鸡VDAC1、VDAC2和MOSPD1基因在前等级卵泡中的时空表达及VDAC基因与产蛋性状的关联SpatiotemporalexpressionofVDAC1、VDAC2andMOSPD1inovarianprehierarchicalfolliclesandassociationwitheggproductioninhens作者姓名：魏曼莉学位类别：农学硕士专业：动物遗传育种与繁殖指导教师：徐日福研究方向：分子数量遗传学与动物育种所在学院：动

2、物科学技术学院2015年3月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使

3、用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作

4、者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月摘要开产日龄、产蛋量和蛋重等产蛋性状是优质蛋鸡育种中的重要性状，而鸡前等级卵泡的发育程度以及同时被募集和选择的优势卵泡数目是决定鸡产蛋能力的关键因素。作为VDAC家族（VDAC1、VDAC2和VDAC3）中广泛存在的重要蛋白，关于VDAC1基因和VDAC2基因的研究较深入，主要包括该基因在细胞能量转化和[2]细胞凋亡中发挥的重要作用。MOSPD1位于人和鼠的X染色体上，是跨膜成年精子蛋白家族（majorspermprotein，MSP）的4个成员之一，编码N末端主要[1]精

5、子蛋白域和两个C末端跨膜区域，在某些间质细胞和上皮细胞转化过程发挥关键作用，如成骨细胞、成肌细胞和脂肪瘤细胞。MOSPD1在密集细胞群中表达量较高，参与卵巢癌的过程。目前国内未见VDAC1基因、VDAC2基因和MOSPD1基因在卵泡细胞中表达的相关文献报道。本研究分为三个部分，分别阐述MOSPD1、VDAC1和VDAC2基因在卵巢中的定位和表达水平，对VDAC基因进行SSCP检测，并进行大骨鸡产蛋性状关联。实验的主要内容有：通过半定量RT-PCR和RNA原位杂交技术，以150日龄有规则产蛋周期的海兰褐蛋鸡为素材，检测VDAC

6、1、VDAC2和MOSPD1基因mRNA在该时期卵泡中的表达和定位情况。半定量RT-PCR检测结果表明，VDAC1基因和VDAC2基因mRNA在150日龄海兰褐前等级卵泡、等级卵泡和卵巢间质中均维持着高表达水平，且表达水平的差异均不显著（P>0.05）。其中，VDAC1基因mRNA在6-7mm和F3中的表达量较高，在F1中的表达量最低；VDAC2基因mRNA在等级前卵泡（直径小于8mm）中的表达量高于排卵前等级化卵泡（F6、F5、F4、F3、F2和F1）。其中，在4-5mm、6-7mm和7-8mm卵泡中的表达量较高，在F2和

7、F1中的表达量最低。VDAC基因的RNA原位杂交结果显示，鸡VDAC1和VDAC2基因在150日龄海兰褐蛋鸡前等级卵泡的卵母细胞、颗粒细胞和膜层细胞中均表达，与半定量RT-PCR的检测结果一致。其中，VDAC1基因mRNA在前等级卵泡颗粒细胞、膜层细胞和卵母细胞中表达水平无显著差异，VDAC2基因mRNA在颗粒层和膜层细胞中表达水平略低于在卵母细胞中的表达水平。MOSPD1基因mRNA在被检测的120个组织样本中均有表达，且表达水平存在差异。在1-4mm卵泡和F1中mRNA相对表达量较高，分别为1.068705±0.260和

8、1.013716±0.465，差异显著（P<0.05）。在F3和F4中表达量较低，分别为0.085935±0.172和0.069848±0.142，差异显著。在表达丰度上，MOSPD1基因的表达低于VDAC1基因和VDAC2基因，对不同时期卵泡发育的调控作用存在剂量依赖性。在本研究条件下，