降钙素原两种免疫检测方法的建立

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1、分类号：密级：公开UDC：编号：降钙素原两种免疫检测方法的建立TwoimmunoassaymethodsofProcalcitonin学位授予单位及代码：长春理工大学（10186）学科专业名称及代码：化学（070301）研究方向：生物与化学分析申请学位级别：硕士指导教师：于源华研究生：张爽论文起止时间：2014.09—2015.12长春理工大学硕士学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的硕士学位论文，《降钙素原两种免疫检测方法的建立》是本人在指导教师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的

2、研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：年月日长春理工大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者及指导教师完全了解“长春理工大学硕士、博士学位论文版权使用规定”，同意长春理工大学保留并向中国科学信息研究所、中国优秀博硕士学位论文全文数据库和CNKI系列数据库及其它国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权长春理工大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，也可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。作者签名：年月日导师签名：年月日摘要降钙素原是有活性的降钙

3、素的初始结构物质，通常是由甲状腺C细胞分泌的，在机体中PCT对血液钙过多的情况有应答反应。降钙素原对于病人菌血症的预测和评估疾病的严重程度上是很重要的依据。因此医学临床近年对于降钙素原的研究及体外诊断方法引起学者广泛关注。本课题建立了降钙素原半定量胶体金免疫检测和ELISA检测方法。通过试验对反应条件以及实验用耗材和试剂来进行优化，达到最佳检测效果。对检测试剂的敏感性、重复性和特异性进行评估。实验结果表明，本研究成功的建立了降钙素原半定量胶体金免疫检测方法，并且制作了标准比色卡。检测范围为10ng/ml、2ng/ml、0.5ng/ml、0.1ng/ml，显色效果和灵敏度较好。性能评

4、估表明研究中建立的试纸条的特异性、重复性以及热稳定性均表现良好。与市售的国产试剂盒相比显色梯度明显，检测限更低，显色效果更好。成功建立了ELISA检测方法，确定了阳性样品的临界值OD450nm=0.2395，线性范围在75ng/L-1200ng/L之间，最低检出限为75ng/L。性能评估显示出了本检测试剂特异性良好，批内以及批间变异系数均小于7%，精密度高。与市售的国产试剂盒相比灵敏度更高，线性更好。关键词：降钙素原胶体金酶联免疫吸附测定细菌感染IABSTRACTProcalcitonin(PCT)isthepre-hormoneofcalcitonin,whichisnormal

5、lysecretedbytheCcellsofthethyroidinresponsetohypercalcemia.SerumPCTisusefulinpredictingbacteraemiaandinassessingdiseaseseverityinpatients.Therefore,thestudiesandinvitrodiagnosticmethodofPCTinclinicalmedicinehavecausedwidescholarsconcernovertherecentyears.Settingupthecolloidalgoldsemiquantitati

6、veimmunochromatographicassayforrapiddetectionofPCTandtheenzyme-linkedimmunosorbentassaydetectionmethodofPCT.Optimizingthereactionconditions,theexperimentalconsumables,thereagentstoachievethebestdetectionresultsbyexperiments.Wealsoevaluatedthesensitivity、repe-atabilityandspecificityofdetectionr

7、eagent.ExperimentalresultsshowedthatthecolloidalgoldsemiquantitativeimmunochromatographyassayforrapiddetectionofPCThasbeensuccessfullyestablished,andwealsomakedthestandardcolorcard.Thedetectionlimitsare10ng/ml、2ng/ml、0.5ng/ml、0.1ng/ml,h