间歇性低氧对大鼠脑缺血后空间记忆及海马区神经细胞自噬的影响

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1、中图分类号：R473.74论文编号：HBLG2015-065UDC：密级：公开硕士学位论文间歇性低氧对大鼠脑缺血后空间记忆及海马区神经细胞自噬的影响作者姓名：刘文倩学科名称：护理学研究方向：危急重症护理学学习单位：华北理工大学学习时间:3年提交日期：2015年5月4日申请学位类别：医学硕士导师姓名：赵雅宁副教授单位：华北理工大学护理与康复学院论文评阅人：匿名单位：匿名匿名单位：匿名论文答辩日期：2015年6月9日答辩委员会主席：田喜凤教授关键词：间歇性低氧；自噬；mTOR；PI3K；脑缺血再灌注唐山华北理工大学2015年6月TheEffectofI

2、ntermittentHypoxiaonSpatialMemoryandHippocampusNerveCellAutophagyinRatafterIschemiaDissertationSubmittedtoNorthChinaUniversityofScienceandTechnologyinpartialfulfillmentoftherequirementforthedegreeofMasterofMedicinebyLiuWenqian(Nursing)Supervisor:ProfessorZhaoYaningJune,2015独创性

3、说明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得华北理工大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。论文作者签名：日期：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解华北理工大学有关保留、使用学位论文的规定，即：已获学位的研究生必须按学校规定提交学位论文，学校有权保留、送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以将学位论文的全部或部

4、分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检索和交流。作者及导师同意论文公开及网上交流的时间：□自授予学位之日起；□自年月日起。作者签名：导师签名：签字日期：年月日签字日期：年月日摘要摘要目的探讨间歇性低氧对大鼠脑缺血后空间记忆及海马区神经细胞自噬的影响。方法本实验将健康雄性Wistar大鼠120只采用数字随机法分成正常对照组（n=20）（UC组）、单纯脑缺血组（n=20）（IR组）、间歇性低氧7天脑缺血组（IH7+IR组）（n=20）、间歇性低氧14天脑缺血组（IH14+IR组）（n=20）、间歇性低氧21天脑缺血组（IH21+IR组）（n=

5、20）、间歇性低氧21天脑缺血+mTOR抑制剂组（抑制剂组）（n=20）。间歇性低氧动物进入低氧舱，低氧箱内氧气浓度维持在5%~21%，形成周期循环，在低氧舱内的暴露时间为7小时/天，分别持续7天、14天、21天。分别在低氧7天、14天、21天后将间歇性低氧动物制备脑缺血再灌注模型。采用改良的Pulsinelli四血管阻断法制备脑缺血再灌注模型，分别于缺血15min再灌注后6h、24h两个时间点处死大鼠。缺血再灌注后24h采用水迷宫法检测各组大鼠视空间记忆能力。各组大鼠的标本采用苏木素-伊红染色法（HE）检测大鼠脑组织海马区神经细胞形态的改变；采用

6、免疫组织化学法和RT-PCR技术检测大鼠脑组织海马区PI3K、mTOR、Beclin-1蛋白表达情况。应用SPSS17.0统计分析软件对所得实验数据进行重复设计的单因素方差分析，以P<0.05，表示差异具有统计学意义。结果1水迷宫检测结果：与UC组比较，IR组大鼠水迷宫检测的逃避潜伏期时间延长、穿台次数减少，差异有统计学意义（P<0.05）；与IR组比较，各组间歇性低氧+脑缺血大鼠的逃避潜伏期时间均延长、穿台次数均减少，差异有统计学意义（P<0.05）；与IH7+IR组比较，IH14+IR组、IH21+IR组大鼠的逃避潜伏期时间均延长、穿台次数减少

7、，差异有统计学意义（P<0.05）；与IH14+IR组比较，IH21+IR组大鼠的逃避潜伏期时间均延长、穿台次数减少，差异有统计学意义（P<0.05）；与IH21+IR组比较，抑制剂组大鼠的逃避潜伏期时间减少、穿台次数增加，差异有统计学意义（P<0.05）。2细胞形态改变结果（HE染色）：UC组大鼠海马区神经细胞排列整齐，结构正常，胞浆淡染，核仁明显；与UC组比较，IR组大鼠6h海马区神经细胞结构形态即出现改变，表现为细胞失去正常结构，部分细胞形态异常；24h海马区可见肿胀的神经元，间质水肿，结构疏松，神经元和胶质细胞出现核固缩、深染，也有部分神经

8、元胞核完全消失，形成空泡状结-I-华北理工大学硕士学位论文构；各组间歇性低氧+脑缺血大鼠脑组织神经细胞破坏严重，均可见较多