鉴别诊断山羊痘、绵羊痘、羊口疮和小反刍兽疫多重pcr检测方法的建立

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资源描述:

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1、V'一H.、、一‘■.—。、-舟辛一、-.;.-?'一占..一'.'*>....、1'尸…'-:一女■'‘■-,V'.-‘—-.人;巧号%1012951.3学校代码'201321605914y.学号UDC6.4—書古落嗦乂爭硕±学位论文,.、/MPCR检测方法的建立鉴别诊断山羊痘、绵羊痘、羊口疮和小反自兽疫多重stectionanddifferentiationofMultiplexPCRfbrsimukaneoude...r'rGoatox,sheeoxorf

2、andesterdesetitsruminantsvirusesppp,pp‘.乂z‘爲舌:李琢心申请人''^’学科名称;兽医硕±八聲J續次\,领域:‘1...r,。:’指导教师:关平原教授一矿一...文一?'一-'、.^..,/:^女^、品'、L?-/-、,?■■^‘-'’气、.、,;;二'V—片‘'...式。.,八,‘K一..:.f少V.';'二〇—五年六月.论文提交日期:>.■?'--■’>/,,,4:/,(;.

3、^‘-■.护’护X二介;、■.v、!-、.粟换.'A.,rV内對立觀齡侧本人申明所對立论规棘人在导腑旨导下进行腳开紅作及取纖獅麻除了文中賊咖桃雨蹄M婦肪外,论文中不卸^也個与我一祖働同古淋研刪麵靴獅匀班论如乍了嘶角㈱兑明^憶。申立论文斗若响本旦朕责任。備错齡东狐日媒MSl^LTS.^内蒙古农业大学研究生学位论文版权使用授权书本了鮮濛古刺快銷关锅巧化戶产獅賊,即;掀化城读学f蝴日产权单欄内熱本人概碑輒《1誦齡,发教仑滅側论,且导;乍成馴騎销就内觀储删错斟跡齡为内权保留并向HW細猶加仑;Mjfi:目附和电子文'?投

4、化午论巧趟彌觸訊学校耶讼布学位t似前全部瓣盼内容(巧密内容除W,締酬備论克觀灌名表聲^^礎名:&7^日/斯^iJTf)巧巧.摘要山羊痘病毒一感染山羊和、绵羊痘病毒、羊曰疮病毒和小反当兽疫病毒均可单绵羊,或多重感染。为快速检测并鉴别四种病毒引起的疾病,建立多重PCR检测方法,并对建立方法进行了实验条件的优化和筛选。根据GenBank数据库收录的山羊痘病毒、绵羊痘病毒、羊口疮病毒和小反与兽疫病毒的基因序列,用PrimerPrimer5.0152b设计四对引物用于扩增四种病毒,其中山羊痘病毒扩增产物长度p,绵羊痘病毒扩増产物长度246bp,

5、羊曰疮病毒扩増产物长度355bp,小反当兽疫病毒扩增产物’’长度巧8bp,优化后的最佳试验条件为;变性温度94C,退火温度53C,循环次数为35次-、猪瘋病毒和牛传染性鼻气。所建立PCR方法对牛病毒性腹泻黏膜病病毒管炎病毒进行扩增均呈阴性,说明该试验有较好的特异性;该PC艮反应体系可检测出山羊痘病毒、绵羊痘病毒、羊口疮病毒和小反当兽疫病毒的最小量分别是〇.〇5ng、8.36ng、O.Sng、1.3ng。结果表明本试验具有快速、特异性强的特点,可用于临床鉴别诊断山羊痘、绵羊痘、羊口疮和小反当兽疫。关键词:多重PCR;山羊痘病毒;绵羊痘病毒;羊曰疮病毒;小反当兽疫

6、病毒MultiplexPCRfbrsimiUtaneousdetectionanddifferentiationofGoatpox,sheeppox,orfandpesterdespetitsruminantsvirusesAbstractGoatpox^1118,sheeppoxvims,orfvirusandpestedespetitsruminantsviruscanlinfinfectgoatsandsheepsingleormultipeections.Fortherapiddet

7、ectionandidentificationof由lykindsofviral出seases,也eestablishmentofamultiplexPC艮.According化theGenBankdatabasehasincludedgo泪poxvims,sheeppoxviras,orfvirusandpastedesetitsruminantsvimsenes

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