红小豆锈病菌鉴定和越冬及侵染过程的研究

《红小豆锈病菌鉴定和越冬及侵染过程的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、Universitycode：10223Classifiedcode：S435.21Graduatenumber：XS1211061Confidentialdegree：PublicityHeilongjiangBayiAgriculturalUniversityMasterDissertationIdentification,overwinteringandinfectionprocessofthepathogencausingadzukibeanrustPostgraduate：ZhengSu-jiaoSupervisor：ProfessorZuoYu-huMa

2、jor：PlantpathologyResearchdirection：FungiandfungaldiseasesofcropsCollege：CollegeofAgronomyDaqingChinaJune,2015摘要红小豆锈病是红小豆生产中危害最为严重的病害之一，在我国各红小豆种植区内普遍发生，已严重影响红小豆的产量和品质。但有关红小豆锈病病原菌的种类国内外存在分歧，关于黑龙江省红小豆锈病菌越冬和侵染过程等方面未见报道。明确黑龙江省红小豆锈病菌的种类、越冬和侵染过程，可以为进一步开展红小豆锈病菌生活史研究和红小豆锈病相关分子生物学研究以及病害防治奠定基础。因

3、此，本研究利用形态学结合ITS序列分析和特异性引物检测的方法，对黑龙江省红小豆锈病菌进行了鉴定，并研究明确了不同越冬条件下的冬孢子的萌发能力，观察了红小豆锈病菌夏孢子的侵染过程，取得了以下主要结果：1.采用单孢子堆分离法获得一株红小豆锈病菌纯培养物ZXL01。采用观测夏孢子芽孔数目、位置和冬孢子壁厚度等形态学特征结合rDNA-ITS序列分析的方法，对其进行鉴定。ZXL01夏孢子发芽孔多为2个，位于孢子赤道部位较远处，冬孢子壁厚度为2.9μm3.3μm。在基于rDNA-ITS序列构建的系统发育树中，ZXL01菌株与两株豇豆单胞锈菌（Uromycesvignae）的参

4、比菌株（GenBank登录号：AB115718和AB115731）在自举值99%相聚一群。用豇豆单胞锈菌的特异性引物UV-ITSF/R进行检测，ZXL01菌株可扩增出500bp左右的特征片段。初步确定黑龙江省红小豆锈病菌为豇豆单胞锈菌。将ZXL01菌株的ITS序列提交GenBank，获得其登录号为KM461700。寄主范围测定结果表明ZXL01菌株的夏孢子只能侵染红小豆植株。推测ZXL01菌株为豇豆单胞锈菌红小豆专化型。2.测试了病菌冬孢子在冬季田间埋地下10cm、冬季室外悬挂、冬季室温、4℃冷藏室和-20℃冷冻室等5种条件下越冬后的萌发能力，结果表明在5种条件储存

5、240d后冬孢子均可萌发，但萌发率差异较大，其中4℃和-20℃越冬处理冬孢子萌发率高达35%以上，说明红小豆锈菌可以冬孢子形态在黑龙江越冬。明确了冬孢子的最适萌发条件为27℃、全黑暗培养。3.夏孢子侵染过程的观察表明，接种后6h，夏孢子即可萌发，并在气孔上方形成附着胞侵入寄主；接种后24h，产生气孔下囊和初级侵染菌丝，初级侵染菌丝在接近叶肉细胞时形成吸器母细胞；接种后48h，可观察到胞内吸器以及次级侵染菌丝的形成；接种后5d，在侵染点周围可见明显的菌落，叶片出现褪绿黄斑；接种后8d，叶片内产生新鲜的夏孢子，叶片的正面和背面均形成大量夏孢子堆。关键词：红小豆锈病，病原

6、菌鉴定，越冬，侵染过程IAbstractAdzukibeanrustisoneofthemajordiseasesofadzukibeanandepidemicinthegrowingregions,whichhasinfluencedseriouslytheyieldlossandqualityofadzukibean.However,thereareconfusionsabouttheoverwinteringofteliosporesandinfectionprocessesofurediospores,especiallytheagentofadzukibe

7、anrust.Thus,theidentificationoftheagentofadzukibeanrust,overwinteringofteliosporesandinfectionprocessesofurediospores,canlayfoundationsfortheresearch,includingthelifecycleandmolecularanalysis.Thus,theobjectivesofthecurrentstudywere⑴toidentifythepathogencausingadzukibean(Vignaangulari