活血通络汤在SANFH家兔造模过程中干预HES1、5,HERP1、2的实验研究

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1、成都中医药大学（临床医学院）二零一八届硕士研究生学位论文活血通络汤在SANFH家兔造模过程中干预HES1、5，HERP1、2的实验研究ExperimentalStudyonInterventionofHES1、5andHERP1、2intheProcessofSANFHRabbitModelEstablishmentwithHuoxueTongluoDecoction研究生姓名：李涛指导老师：江蓉星教授学科专业：中医骨伤科学二○一八年五月学位论文活血通络汤在SANFH家兔造模过程中干预HES1、5，HERP1、2的实验研究ExperimentalStudyonInterve

2、ntionofHES1、5andHERP1、2intheProcessofSANFHRabbitModelEstablishmentwithHuoxueTongluoDecoction李涛指导教师姓名：江蓉星教授申请学位级别：硕士专业名称：中医骨伤科学论文提交时间：2018年5月论文答辩时间：2018年5月二○一八年五月成都中医药大学2018届硕士学位论文摘要【研究目的】通过观察活血通络汤在防治激素性股骨头坏死（SANFH）家兔HES1、5和HERP1、2等相关基因在造模前、造模中、造模后不同阶段的表达及变化；并通过光镜、电镜等多种检测手段，从病理学角度更细微、客观的观察家

3、兔股骨头骨组织标本改变情况，来研究活血通络汤防治SANFH可能的作用机制,为本病提供一个新的治疗手段。【研究方法】将192只日本大耳兔随机分为A、B、C、D四组，分别为预防治疗组、治疗组、模型对照组、空白组，每组各为48只。A、B、C三组均在第3周时采用贺西京造模法制造激素性股骨头坏死模型,造模周期时长为6周。A组在第二周时（即造模前一周）开始喂服活血通络汤制成的中药饲料；B组在造模同时也喂服中药饲料；C、D两组同前不变。在实验的第2、5、8周末各个特定的时间节点每组随机抽取8只兔子用PCR（实时荧光定量法）法测定血清中HES1、5，HERP1、2的含量，并且持续动态观察其

4、股骨头的大小、外观及一般形态，同时截取双侧的股骨头做病理切片，光镜、电镜观察骨组织的组织形态学结构电镜，统计空骨陷窝率等。【研究结果】1、HES1：在各周末，D组的表达值均小于A组，随着时间的推1成都中医药大学2018届硕士学位论文移，两组之间的差距逐渐缩小，在第二周时两组之间差距最大（P<0.01），差异有明显统计学意义。B组（治疗组）在每周末的基因表达值也均高于D组，在第二、五周末时两组之间比较，统计学意义明确。C组各周末的结果均高于D组（P<0.01），统计学意义明确。而A、B、C三组比较，A、B组的检测结果均低于C组，而A组的检测结果又较B组低。2、HES5：在第2

5、、5周末时，A组的基因表达值均明显高于D组，第8周末时，突然显著降低，较D组偏低。两组之间（P>0.05），差异无统计学意义。A、B、C三组之间检测结果比较（P>0.05），差异无统计学意义。3、HERP1：在各周末，A、C组比较，检测结果均低于C组，尤其第五周末时，两组之间（P<0.05）统计学意义明确。B、C组在第2、5周末时，其基因表达值均高于D组，在第五周末时，B、D两组及C、D两组分别比较（P<0.01）,统计学意义明确。第8周末时，B、D及C、D两组之间（P>0.05），统计学意义不明确。4、HERP2：在第2周末时，A组的检测结果略高于D组，第5、8周末时，检

6、测结果出现下降比D组低，P>0.05统计学意义不明确。B、C组的检测结果在各周末与D组比较，P>0.05统计学意义不明确。A、B、C三组间比较，P>0.05统计学意不明确。2成都中医药大学2018届硕士学位论文【研究结论】1、激素致股骨头缺血性坏死的发生机制与Hes1蛋白基因呈正相关关系，而活血通络汤促进坏死骨细胞修复、重建，防止骨细胞凋亡的作用机制与Hes1蛋白基因呈负相关关系；而两者与Herp1蛋白基因的关系还不能确切了解，其具体的作用机制还有待进一步的研究；2、Hes5、Herp2蛋白基因调节作用与激素致股骨头缺血性坏死的发生机制及活血通络汤促进坏死骨细胞修复、重建，

7、防止骨细胞凋亡的作用机制没有确切关系。可能是因为Hes5、Herp2蛋白基因不参与骨细胞的调节作用，但不能排除其参与其他细胞的调控反应。3、综上可知，Hes1可能是下游起主要调控作用的靶基因，是作用的靶点。激素可以通过上调Herp1蛋白基因的表达结果，从而发生骨细胞的分化、凋亡，致股骨头坏死的病理结果，而活血通络汤中药也可通过信号通路作用，起到拮抗激素效应，产生反向调节作用，下调Herp1蛋白基因的表达结果，及降低股骨头空骨陷窝率的发生率，表明活血通络汤促进坏死骨细胞修复、重建，防止骨细胞凋亡，起到早期早期干预治疗