柱层析法分离鲟鱼胆汁的研究

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1、武汉工程大学硕士学位论文柱层析法分离鲟鱼胆汁的研究姓名:陈蓉申请学位级别:硕士专业:化学工艺指导教师:陈启明20080501摘要湖北宜昌天峡鲟业有限公司是国t彬,l-鲟鱼品种最多、规模最大的种质资源库。本课题选用鲟鱼胆汁作为研究对象,先采用薄层层析法对洗脱剂进行筛选和优化,再用硅胶柱层析法对鲟鱼胆汁的有效成分进行分离,比较了不同的洗脱剂体系、不同的硅胶粒径和填料高度对分离效果的影响,并对分离物的结构进行分析鉴定。实验采用粒径为0.125--0.180ram(80~120目)硅胶,依次用石油醚/乙酸乙酯体系(10:1,5:1,2:1,v/v)进行梯度洗脱,分

2、离效果不太理想,只分离出单一的组分l,组分1、2在大部分流份中同时洗脱出来,未实现组分l、2的完全分离。实验依次用氯仿、氯仿/乙醇(40:1,v/v)、氯仿/7,醇/1%醋酸(60:15:1,v/v/v)、氯仿/7,醇/1%醋酸(30:30:1,v/、咖)、丙酮/乙醇/水(2:1:1,v/v/v)作洗脱剂,可以分离出鲟鱼胆汁中的6种主要组分。分别采用粒径为0.125-4).180ram(80~120目)硅胶,填料高度为290mm和采用粒径为0.075---0.150mm(100~200目1)硅胶,填料高度为500mm进行两次分离。由两次实验结果得出,通过增

3、加硅胶填料的高度,减小硅胶的粒径,可以大大提高分离效果。结合分离物的紫外可见光谱和红外光谱,初步推断组分l为游离型石胆酸,组分2可能为游离型鹅去氧胆酸或游离型胆酸,两者在鲟鱼胆汁均微量存在,总含量约5%;组分4为牛磺鹅去氧胆酸或牛磺胆酸,在鲟鱼胆汁中以钠(钾)盐的形式存在,在鲟鱼胆汁中约占10%;组分5为甘氨鹅去氧胆酸,为鲟鱼胆汁中主要成分,含量约55%;组分6为胆绿素的钠(钾)盐,含量约6%;组分3的含量为2.16%,无法确定为什么物质,有待进一步深入研究。实验还对鲟鱼胆汁的水解方法和条件进行了探索,得出在120℃下水解5小时,可成功水解鲟鱼胆汁。武汉工

4、程大学硕士学位论文关键词:鲟鱼胆汁;薄层层析;硅胶柱层析;分离;水解IlAbstractSturgeonbilewhichwascollectedfromTianxiaSturgeonindustrylimitedcompany,thebiggestresourcepoolwiththemostvarietyandthelargestscaleinnationandoverseaswaschosenastheobjectinthisstudy.FirstlythesolventwasscreenedandoptimizedbyThinLayerChroma

5、tography,thenthevalidcomponentsofSturgeonbilewassepemtedbySilica—GelColumnChromatography,followedbytheinfluenceofdifferentsolventsystems,differentparticlesizeofSilica-Gelanddifferentfillingheightontheseparationeffect,finallytheanalysisandidentificationofwhatwasseparatedwerecarried

6、outinthispaper.Intheformerexperimentgradientelutionwascardedoutattheconditionthatthesilica—gelwith80-120mesh,petroleumetherandaceticestermixedattheratioof10:1,5:1,2:1byvolumewererespectivelyused.However,theseparationeffectwasnotperfectlyidealinthatcomponent1andcomponent2,elutingfr

7、ommostoftheliquidatthesametime,werenotcompletelyseparated,andonlysinglecomponent(component1)wasseparated.Following,chloroform,chloroformandethanolmixedattheratioof40:1byvolume,chloroform、ethanoland1%aceticacidsolutionmixedattheratioof60:15:1byvolume,chloroform、ethanoland1%aceticac

8、idsolutionmixedattheratioof30:30"

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