利用开孔明胶固定化啤酒酵母生产atp的研究

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1、广西大学硕士学位论文利用开孔明胶固定化啤酒酵母生产ATP的研究姓名：谢小瑜申请学位级别：硕士专业：化学工艺指导教师：雷爱祖;童张法20060501广西大学硕士学位论文利用开孔明胶同定化啤酒酵母生产A'rP的研究利用开孔明胶固定化啤酒酵母生产ATP的研究摘要利用固定化酵母催化一磷酸腺苷(AMP)磷酸化生成三磷酸腺苷(ATP)是最有工业前景的ATP生产方法之一。该法的中心内容包括：稳定的细胞质量、适宜的固定化形式、适宜的反应操作条件等。本文对酵母的培养条件、开孔明胶固定化细胞的制备条件以及ATP生产的反应条件进行了较深入的探讨和试验研究。此外还建立了ATP分离与提纯的实验方法，并

2、通过实验考察了发酵液的ATP回收率、成品ATP的纯度以及ATP的实际产率。首先选用了一株转化率较好但稳定性差的酵母菌株，对扩培培养基中的蔗糖蜜、蛋白胨、呷4)2S04、KH2P04四种因素不同浓度水平进行正交实验，研究其对培养酵母菌浓及ATP转化活性的影响，确定了用于ATP生产的酵母细胞培养工艺的较佳配方，其结果为：m(蔗糖蜜产12％，历(蛋白胨户O．70％，m(KH2P04户O．15％，m((NH4hS04)=O．25％。实验还确定了该啤酒酵母适宜的扩大培养时间是14-20dx时。研究了开孔明胶固定化啤酒酵母细胞的制备条件，结果表明15％的明胶和2％的海藻酸钠形成的复配胶包

3、埋10％的啤酒酵母细胞制备成的固定化颗粒经2％戊二醛交联ltJs时具有较高的磷酸化活性。利用该固定化颗粒研究了酵母酶系生产ATP的反应机理，考察了多种因素对ATP转化情况的影响，结果表明用开孔明胶包埋啤酒酵母制成的固定化细胞，在含有159／LAMP，葡萄糖150mmol／L，硫酸镁16mmol／L，pn7．0的磷酸缓冲液250mmol／L中35℃振荡反应2小时，ATP转化率可高达95％广西大学硕士学位论文利用开孔明胶周定化啤酒酵母生产A1．P的研究以上。底物溶液灭菌和添加烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)后，该固定化酵母细胞可反复使用10次，ATP的转化率稳定维持在90％以上。

4、通过ATP分离与提纯的实验，得出发酵液的ATP平均回收率为72．3％，平均成品纯度为92．3％，平均产品实物产率为102．3％。关键词：5。．三磷酸腺苷固定化啤酒酵母细胞开孔明胶，。II广西大学硕士学位论文利用开孔明胶固定化啤酒酵母生产ATP的研究ATPPRODUCTIoNBYBEERYEASTCELLSIMMOBILIZEDINoPENPoREGELATINMATRIXABSTRACTUsingimmobilizedyeastcellstoyieldadenosinetripHospHate(ATP)fromadenosinemonopHospHate(AMP)isoneo

5、fthemostinterestingtechniquesinATPindustry．ThekeytechniquesintheATPproductionarethesteadyofthecellquality,theappropriatemethodofimmobilizationandoperationalconditions．Inthedissertation,thecultivationofyeast，thepreparationofimmobilizedcellsinopenporegelatinbatrixandtheoperationalconditionsof

6、ATPfermentationwereinvestigated．Besides，theseparationandpurificationtechniqueofATPproductionwasbuilt，theATPrecovery，thepurityofATPproductandvirtualproductivitywerealsodiscussedwiththeexperiment．Firstofall，astrainofbeeryeastwhichhashighconversionratebutlowstabilitywasselected．Accordingtoorth

7、ogonalexperimentaldesign，theeffectsoffourfactors(contentsofcanesugarhoney，peptone，(NH4)2S04andKH2P04)atthreelevels011thecellsconcentrationandtheATPconversionactivitywereinvestigatedandthentheoptimalratioofcomponentsintheexpandingculturemediumweredetermin