基于1，4-二氯萘、2，6-二氯萘的微生物降解实验研究

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1、湖南大学硕士学位论文1，4-二氯萘、2，6-二氯萘的微生物降解实验研究姓名：吴小莉申请学位级别：硕士专业：市政工程指导教师：余健20080602l，4．二氯萘，2，6．二氯萘微生物降解实验研究摘要本文在综述国内外文献的基础上，首次以摇瓶实验的形式对l，4．二氯萘和2，6一二氯萘的微生物降解进行了系统的研究。实验以垃圾渗滤液处理池的活性污泥为菌源，筛选出了一株细菌HY，16SrRNA同源性分析该菌为假单胞菌属(Pseudomonassp)。在25℃、180r／min、pH=7、OD600=0．25、初始浓度10mg／L、20、50mg／L条件下，10、20mg／L浓

2、度的1，4．二氯萘在2天和5天内可完全降解，但初始浓度为50mg／Ll，4．二氯萘的生物降解在80h后几乎停滞，降解率只有40％；且实验过程中光密度均逐渐下降，细菌无生长现象。而投加萘(50mg／L)时，50mg／L的1，4．二氯萘可在300h完全降解，但是在降解的两i．f8h存在萘的竞争抑制作用。进行了以肉汤培养基富集菌液对1，4．二氯萘的降解对比实验，确定1，4．二氯萘不支持微生物生长，HY菌对1，4．二氯萘的降解属共代谢范畴，HY菌对1，4．二氯萘的降解是以萘的诱导为前提的。HY菌不能共代谢2，6．二氯萘，静息细胞实验也证实了该菌不能产生降解2，6．二氯萘的

3、酶系。结合l，4．二氯萘、1．氯萘、2．氯萘的生物降解的实验结果分析，认为位于不同苯环上的氯取代不利于微生物降解。对不存在初级基质条件下，1，4．二氯萘的降解实验数据进行了动力学研究，10、20mg／L的生物降解符合一级反应动力学，一级反应速率常数分别为O．0626、O．0265一，半衰期分别为15．97h、37．74h，50mg／L的生物降解介于零级反应和一级反应之间：采用不存在初级基质条件下的三种共代谢模型对l，4．二氯萘的微生物降解进行非线性拟合，结果显示模型3对三种浓度下l，4．二氯萘的生物降解拟合较好，其对应的表观生物量转化浓度砰分别为0．1932、0。

4、2869、0．2789。利用气相色谱质谱联用仪(GC．MS)对1，4．二氯萘降解的中间产物进行了定性分析，检测到了二氯代水杨酸、环氧化氯萘、二氯代水杨醛，二氯代萘酚，硅烷衍生化样品的GC—MS分析显示，产物中可能还还存在二羟基二氯代萘，并据此推测l，4-二氯萘生物降解的途径为5，6位或7，8位加单氧后羟基化，苯环开裂后再生成氯代水杨酸。关键词：1，4一二氯萘；2。6一二氯萘；微生物降解；假单胞菌属；共代谢动力学；降解途径硕十学位论文AbstractOnthebasisofsummarizingtherelatedreferenceshomeandabroad．as

5、eriesofshakeflaskexperimentshadbeenconductedtostudythebiodegradationofl，4-dichloronaphthalene(1，4-DCN)and2,6．dichloronaphthalene(2．6．DCN)．WeisolatedastrainnamedHYfromtheactivedsludgeatalandfillleachatetreatmentplant，thestrainhadbeenidentifiedasPseudomonassp．bytheanalysisof16SrRNA．unde

6、rtheconditionof25℃、180r／min、pH=7、OD600=0．25、initialconcentration10、20、50mg／L，Thestrainwereabletobiodegraded10mg／L1,4．DCNin48hand20mg／L1，4-DCNin120h，butthebiodegradationwhichintialconcentrationwas50mg／Lalmostceasedafter80h，anddegradationratewasonly40％：intheseexperimentsphotodensityOD60

7、0alldecreasedgradually，butwhennaphthaleneexisted，50mg／L1，4·DCNcouldbetotallydegradedin300h．howeverthereWasaacclimatizationphaseof8hbecauseofcompetitioninhibitionefIfectfromnaphthalene．bycomparingwithdegradationexperimentbystrainwhichgrownonbrothmedium，weconcludedthatHYstrainshouldcome

8、tabol