黑色素瘤荷瘤小鼠脾脏t细胞亚群的动态检测及其意义

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生签名：遵军泼导师签章：l目研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特,另JDn以标注等内容外，文中不包含其他人已发表或撰写的研究成果，指

2、导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：湿军鬯导师签章：月曰目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一5研究论文黑色素瘤荷瘤小鼠脾脏T细胞亚群的动态检测及其意义前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10U日lJ吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一29参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30综述T淋巴细胞与细胞治疗的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。41个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-42中文摘要黑色素瘤荷瘤小鼠脾脏T细胞亚群的动态检测及其意义摘要目的：监测黑色素瘤荷瘤小鼠脾脏T细胞亚群随时间的数量变化，可为评估临床肿瘤患者的免疫状态、判断肿瘤复发、病人预后

4、、以及临床疗效提供依据，评估预后有重要的临床意义。方法：从120只条件均等的健康小鼠中选出6只正常小鼠作为基础值测定，其余114只小鼠随机平分为2组，荷瘤组(A组，57只)和空I刍(PBS、)组(B组，57只)。于发现出瘤当天(Do)，从A组随机选取5只测量并绘制肿瘤生长曲线。对于A组剩余小鼠和B组小鼠，自Do当日(含Do)开始，每隔5天各随机选出6只小鼠处死、取脾，制备单细胞悬液，行流式细胞(FACS)检测，确定CD3+T、CD4+T、CD8+T、初始T细胞在脾淋巴细胞悬液中所占比例，及CD4+T／CD8+T比值，直至荷瘤曲线观测组小鼠或A组剩

5、余小鼠中出现半数以上死亡时结束观察。结果：1CD3+T淋巴细胞所占比例的动态变化：①空白组与荷瘤组相比，在Do(U=4．500P<0．05)、Ds(U=0．000P<0．05)、Dlo(U=0．000P<0．05)、D15(U=0．000P<0．05)、D20(U=0．000P<0．05)、D25(U=0．000P<0．05、)之间均存在统计学差异，表明CD3+T的数量随荷瘤天数的延长，空白组明显高于荷瘤组；②空白组内，正常小鼠、Do、D5、Dlo、D15、D20、D25之间有统计学差异(F=-4．960P=0．001)，其中正常小鼠、Do、D5

6、、D10、D15分别与D20、D25有统计学差异(尸O．05)，表现CD3+T淋巴细胞的数量在Do和D15之间基本不变，为64．7，D15之后CD3+T淋巴细胞的数量随时间呈下降趋势，以17．6％的下降率降为D25时的53．4。③荷瘤组内，正常小鼠、Do、D5、Dlo、D15、D20、D25相互之间有统计学差异(F=3397．196P<0．05)，其中任何两者之间均有差异(尸

7、，降为D25时的7．9，下降率为87．2％。2CD4+T淋巴细胞所占比例的动态变化：①空白组与荷瘤组相比，于Do时无统计学差异(仁一0．036P=0．972)，D5、Dlo、D15、D20、D25均有统计中文摘要学差异(t-一14．933尸<0．05、U=0．000P<0．05、t=-37．860P<0．05、U--0．000P<0．05、U=0．000P<0．05)，表明CD4+T的数量随时间延长，空白组明显高于荷瘤组；②空白组中，正常小鼠、Do、D5、D10、D15、D20、D25之间有统计学差异(F=3397．196P<0．05)，其中正常

8、小鼠、Do、D5、D10、D15与D20、D25分别相比，均有统计学差异存在(尸