水杨酸诱导梨抗轮纹病作用机制研究

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1、分类号：墨鳗!：呈密级：公珏单位代码：!鱼Q璺鱼学号：星QQ旦星墨水杨酸诱导梨抗轮纹病作用机制研究StudiesontheMechanismofInducedDiseaseResistancebySalicylicAcidagainstPhysalosporapiricolaNoseinPears学位申请人：高丽娟指导教师：张玉星教授学科专业：果树学学位类别：农学博士授予单位：河北农业大学答辩日期：二。一三年六月三日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知

2、，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得塑i垦盔些盘鲎或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：高丽交白签字日期：pl≥年／月弓日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑兰垦盔些盘鲎有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权塑I垦挫盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库

3、进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)．7N学位论文作者签名：南雨文唧导师签名：身齿／抄比：／签字日期：为b年／月；日签字Et期：pf≥年彳月；日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：电话：邮编：摘要梨是我国的优势树种，也是我国传统的出口创汇果品。梨轮纹病是梨生产上主要病害之一，目前，主要依靠化学杀菌剂防治，但长期使用化学杀菌剂不仅易使病菌产生抗药性，而且存在农药残留等问题，对食品安全、环境保护以及人类健康等造成不利影响。植物诱导抗病性是

4、控制植物病害的重要方法之一，水杨酸是已经被认定的系统获得抗性化学诱导剂。本研究以主栽品种鸭梨(Pyrusbretschneideri‘Yali’)为试材，探讨水杨酸诱导梨抗轮纹病的作用效果，从植物抗氧化酶、病程相关蛋白等方面阐述水杨酸诱导增强梨对轮纹病抗性的生理生化机制。并通过研究水杨酸诱导及轮纹病菌胁迫对梨叶绿素荧光特性、电阻抗参数的影响，试图为利用叶绿素荧光技术、电阻抗技术监测梨轮纹病提供初步的参数。采用实时荧光定量PCR的方法，对水杨酸诱导后梨中NPRl基因转录表达水平进行分析。主要研究结果如下：1．

5、水杨酸处理显著提高鸭梨对梨轮纹病的抗性。用0．2mmol·L。水杨酸对鸭梨叶片及果实诱导处理，接种轮纹病菌后，叶片的病情指数显著降低，诱抗效果达21。86％；诱导处理后的果实在接种3d时，发病率比对照降低38．64％，接种7d时，果实病斑直径显著低于对照。水杨酸对轮纹病菌毒性测定结果表明0．002—0．2mmol·L1水杨酸对轮纹病菌的生长无抑制作用，即O．2mmol·L。1水杨酸对轮纹病菌无直接毒性，说明水杨酸诱导后梨对轮纹病抗性的增强是来源于其对植物的诱导抗病性作用。2．外源水杨酸诱导后梨叶片中内源水杨

6、酸总含量升高，其中游离态水杨酸含量降低，结合态水杨酸含量升高，表明水杨酸诱导梨系统获得抗病性的建立与内源水杨酸状态的改变相关。对叶片中超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)同工酶谱的分析结果表明，水杨酸诱导处理后SOD、PPO同工酶谱均未出现新的酶带，但酶谱带表达量增强。3．水杨酸诱导处理后梨叶片及果实中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、13．1，3一葡聚糖酶(GLU)和几丁质酶(CHI)活性增强，并且降低了膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)和超越阴离子(·02)的含量，表明水杨酸对其有系

7、统诱导作用，增强梨对轮纹病菌侵染的抵抗能力。4．病菌侵染后叶片的光系统II最大原初光能转换效率(F1l佩)、实际光化学效率(yr∞)、光化学猝灭系数(矿)、最大表观电子传递效率(E豫一)减小，说明病菌对光系统Il反应中心造成破坏。外源水杨酸诱导后梨叶片的非光化学猝灭系数(NPQ)、光系统II原初量子效率(Q)和最大表观电子传递效率(E豫～)提高，光化学猝灭系数无显著变化。诱导叶片接种病菌后，光系统Il最大原初光能转换效率(n纡锄)、光化学猝灭系数(qP)和最大表观电子传递效率(E豫。。)降低幅度减小，表明水

8、杨酸能够缓解病菌对光系统lI反应中心的伤害，提高光系统1I反应中心对光能的吸收利用。5．0．2mmol·L。1水杨酸诱导后，接种病菌叶片的高频电阻率、低频电阻率、胞外电阻率、胞内电阻率和弛豫时间分布系数减小：接种病菌果实的低频电阻率、胞外电阻率和弛豫时间增大，高频电阻率、胞内电阻率和弛豫时间分布系数减小。6．克隆鸭梨NPRl基因，研究外源水杨酸对NPRl基因的表达调控。结果表明NPRl基因在梨不同器官中的表达量差