茄子抗褐纹病机制与转录组测序研究

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1、分类号：单位代码：10193密级：学号：2009738博士学位论文茄子抗褐纹病机制与转录组测序研究StudyontheResistanceMechanismandTranscriptomeSequencingofPhomopsisvexaninEggplant作者姓名：陈姗姗学位类别：农学博士专业名称：作物栽培学与耕作学研究方向：蔬菜生理指导教师：宋述尧所在学院：农学院2015年5月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林

2、农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业

3、大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日导师签名：签字日期：年月日摘要茄子褐纹病每年给生产茄子的国家和地区造成巨大的经济损失，该病害不仅对茄子生长发育的危害非常严重，且主要侵染危害茄子果实，造成产量下降和品质降低，尤其是采种田更容易发病，严重影响茄子生产以及育种和制种。本研究以茄子褐纹病为研究对象，以植物病理学、植物育种学和分子生物学等理论和技术为依据，对不同抗性的茄子

4、品种进行了褐纹病的抗病性鉴定及种质筛选，探讨茄子褐纹病的抗病机制和遗传规律，采用现代生物技术寻找与茄子抗褐纹病基因紧密连锁的分子标记，同时通过利用转录组测序技术研究茄子抗褐纹病的相关基因及转录组差异，以期为该抗病基因的鉴定、资源筛选、分子标记辅助育种及分子克隆奠定了良好的基础，从而加快茄子抗褐纹病育种进程。研究的主要结果如下：1．建立了茄子褐纹病苗期、结果期人工接种鉴定方法，提出了褐纹病病害分级和抗性分类标准。（1）苗期人工接种鉴定采用喷雾法，接种菌量为1×107cfu/mL，接种时期为5叶期，接种15d后调查病情。（2）活体果实接种鉴定用孢子浓度1×107cfu/mL浸湿的滤纸片放

5、入茄子果蒂和果实交界处进行接种；离体果实接种鉴定以5mm长“十”字伤口接种菌丝块法接种最好，接种12d后调查病情。2.结合苗期喷雾接种法和结果期离体菌丝块接种鉴定能明显区分供试的16个茄子品种的抗病类型，高抗品种（系）2份（83-02、成都墨茄王）、抗病品种2份（墨丽长茄、83-02×长茄1号F1）、中抗品种3份（朝研黑星、早熟黑茄王、83-02×长茄1号高世代自交系）、高感品种4份（长茄1号、黑又亮、早熟紫长茄、英七长茄）、中感品种3份（日本茄子、鹰嘴长茄、黑龙长茄）和感病品种2份（黑豹长茄、三月长茄）。3.不同抗、感品种的结构抗性和生化抗性不同。（1）用扫描电镜对不同抗病性的茄子

6、品种果实表皮结构进行比较观察，结果发现：抗病品种表皮厚度在100μm左右，果实表皮细胞角质层厚，外果皮细胞层数多，细胞排列非常紧密；感病品种表皮厚度在50μm以内，果实表皮细胞角质层薄，外果皮细胞层数少，细胞排列疏松。经聚类分析发现，高抗病品种（系）聚为第一类，抗病品种聚为第二类，所有的感病品种被聚成第三类。（2）POD、SOD、PPO、PAL活性的高低可作为判断茄子品种抗病性的重要指标，即茄子叶片组织的酶活性越高，品种的抗褐纹病能力越强。POD、PAL、SOD和PPO活性在整个侵染期均呈现先升高后降低的趋势，CAT的活性变化在整个侵染期都呈现下降的趋势。（3）MDA含量和电导率变化

7、与茄子品种的褐纹病抗性呈负相关关系；抗病品种体内含有的基础活性物质（可溶性糖、可溶性蛋白质及脯氨酸）的含量等均高于感病品种。4.高抗褐纹病品系‘83-02’的抗性为单基因显性遗传。茄子高抗褐纹病品系‘83-02’与高感品种杂交组合的正反交F1代，均表现抗病，F2代群体中的抗、感植株比例经卡方测验符合3:1，F1与感病亲本回交，其回交后代的抗、感植株分离比经卡方测验符合1:1。5.建立了一套清晰度高、重复性好的适合茄子褐纹病抗病基因的RAPD反应体系，采用B