转录组测序揭示山羊和绵羊疼痛应答遗传机制研究

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1、分类号Ｓ８１３．３学校代码１０１２９＾ＰｉＷＨ？—＇一＊ＵＤＣ６３１学号２０１１３１１００１＾書本蓉＂東攀博ｄｒ学位论文转录组测巧揭示山羊和绵羊疼痛应答遗传机制硏究ｓｔｕｄｙｏｎＧｏａｔａｎｄＳｈｅｅｐＰａｉｎＲｅｓｐｏｎｓｅＧｅｎｅｔｉｃＭｅｃｈａｎｉｓｍｂＴｒａｎｓｃｒｉ化ｍｅＳｅｕｅｎｃｉｎｙｐｑｇ申请人：邓秀玲学科ｎ类；农学学科专业：动物发育生物学与生物技术研究方向：动物细胞发育与调控指导教师：周欢敏教授＾５９

2、＇二〇－论文提交日期：五年六ＡＩＨｍ＇ｉ内蒙古农业大学研究生学位论文独创声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研巧成果。据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包巧为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在，与我论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处一切相关责，本人承担任。论文作者签名’／／

3、：５＾旅日期：万）化户巧蒙古农业大学研巧生学位论文版权使用授权书本人完全了解内蒙古农业大学有关保护知识产权的规定，目Ｐ；研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属内蒙古农业大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为内蒙古农业大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为内蒙古农业大学。学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅。学校可Ｗ公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外），采用影印、缩印或其他手段保存论文。

4、论文作者签名；珠＊於指导獅签名：、‘Ｉ日期；城《！摘要慢性疼痛是常见的复杂的神经病理与主观感受症状，在不同物种之间对疼痛的感受存在着明显的差别。脊髓背根神经节（ｄｏｒｓａｌｒｏｏｔａｎｌｉｏｎ，ＤＲＧ）是痛觉ｇｇ产生、维持和传导的初级中枢。因此研究ＤＲＧ的转录组有助于系统认识慢性疼痛发生的调控机制和疼痛致病基因的筛选。本研究选择ＣＦＡ疼痛处理（实验组）－，每组３只和未处理（对照姐）的绵羊和山羊各２组，取其ＤＲＧ組织，通过ＲＮＡｓｅｑ高通量测序与生物信息学分析，揭示不

5、同物种间疼痛响应的基因调拉模式，取得如下主要结果：１．疼痛的调控发生在转录水平、转录后水平和可变剪接水平。２．差异基因聚类结果显示，实验组山羊和绵羊的基因表达模式发生了显著变化。３．ＤＥＧ分析，实验组山羊获得差异表运基因１７４８个，绵羊２，４４１个；种间，差异基因２，９３５个，其中，仅在绵羊ＤＲＧ表达的基因４２６个，仅在山羊表达３５３个。４．ＧＯ分析显示Ｊｌ及，山羊参与炎症应答、免疫应答、损伤应答和防御应答ｔｎ控离子通道、神经递质及其受体等相关基因表达变化显著，如：ＣＣＬ２

6、７、ＰＲＫＡＣＡ、ＧＡＢＲＡ４、Ｇ民ＩＡ２、ＧＲＩＫ３、ＣＡＣＮＡ１Ｅ、ＳＣＮ３Ａ、ＫＣＮＫ１等基因通过上调或下调参与疼痛应答，发挥了关键调控作用，该结果提示炎性疼痛发生时山羊的免疫系统发生了显著变化。这些差异基因参与了Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓｉｇｎａｌｉｎｇａｔｈｗａ、Ｒｅｔｒｏｒａｄｅｅｎｄｏｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄｓｉｎａｌｉｎｇ、Ｃａｌｃｉｕｍｓｉｎａｌｉｎａｔｈｗａ、ｐｙｇｇｇｇｐｙＧｌｕｔａｍａｔｅｒｇｉｃｓｙｎａｐｓｅ、ＭＡＰＫｓｉｇｎａｌｉｎｇａｔｈｗａ等途径，

7、它们的激活在山羊疼痛ｐｙ应答中起了关键作用。５．ＧＯ分析显示，绵羊抑制性神经递质及其受体基因如ＧＡＢ民Ｇ３、ＧＡＢＲＢ２、ＧＡＢＲＢ１、ＧＬＲＡ３、ＣＬＣＮ７表达活跃；疼痛应答过程中ＳＣＮ９Ａ、ＳＣＮ４Ｂ、ＳＣＮ－１１Ａ、ＳＣＮ８Ａ、ＳＣＮ７Ａ、ＳＣＮ１０Ａ、ＴＲＰＶ１等编码电压ｎ；空钢离子通道及参与納寓子运输、神经营养因子信号途径相关基因表达下调，其中ＳＣＮ９Ａ、ＴＲＰＶ１表达下调与疼痛耐雙相关。差异基因參与ＧＡＢＡｅｒｇｉｃｓｙｎａｐｓｅ、Ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎｓｉｇｎａ

8、ｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ．Ｒｅｔｒｏｇｒａｄｅｅｎｄｏｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄｓｉｇｎａｌｉｎｇ、Ｍｏｒｐｈｉｎｅ－－－ａｄｄｉｃｔｉｏｎ、Ｎｉｃｏｔｉｎｅａｄｄｉｃｔｉｏｎ、Ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｇａ化ｄｉｏｎｃｈａｎｎｅｌｌｉｇａｎｄｂｉｎｄｉｎ呂等迎路，衷明这些迪路可能参与了绵卞疼滿应答过程。６，．种间差异基因ＧＯ分析显示电压口挖离子通道、损伤化答