木鳖子对羟基桂皮醛诱导黑色素瘤细胞分化的实验研究

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1、目录哪MllUlMIIllIY2337826中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文木鳖子对羟基桂皮醛诱导黑色素瘤细胞分化的实验研究引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．7第一部分木鳖子提取的九种单体化合物体外抗肿瘤活性的研究—1￡．—j。日{J舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．10附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．12附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．17小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18第二部分木鳖子对羟基桂皮醛体外诱导B16细胞分化及其机制的实验研

3、究—、．￡』—j—一日!J舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20材料与方法⋯■⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．21结果⋯⋯⋯_⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．33附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯40讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．42小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．44参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48综述诱导黑素瘤细胞分化的药物及其分化机制的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯49致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯66个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．67中文摘要木鳖子对羟基桂皮醛诱导黑色素瘤细胞分化的实验研究摘要目的：研究从中药木鳖子中提取的九种单

5、体化合物对小鼠黑色素瘤细胞生长的影响，筛选出作用效果最显著的单体化合物；从形态及功能方面观察对羟基桂皮醛诱导B16细胞分化的作用；并从基因及蛋白水平探讨其作用机制，为其作为抗肿瘤新药开发提供参考依据。方法：l从不鳖子中提取对羟基桂皮醛、松柏醛、对羟基苯甲醛、3．甲氧基对羟基苯甲醛和ligballinol等九种单体化合物；采用SRB法检测九种单体化合物对B16细胞生长的影响，计算生长抑制率，并在光镜下观察细胞形态变化。2SRB法检测不同浓度对羟基桂皮醛(2、4、699／m1)作用24h、48h、72h后，对

6、B16细胞增殖的抑制作用。3采用瑞一姬染色法观察不同浓度对羟基桂皮醛(2、4、699／m1)作用于B16细胞72h后，对细胞形态的影响。4比色法检测6}tg／ml对羟基桂皮醛作用于B16细胞48h后，对细胞黑色素含量和酪氨酸酶活性的影响。5采用生长曲线的方法检测699／ml对羟基桂皮醛作用于B16细胞48h后，对细胞增殖能力的影响。6采用克隆集落形成试验检测699／ml对羟基桂皮醛作用于B16细胞48h后，对细胞克隆增殖能力的影响。7采用划痕试验检测6}tg／ml对羟基桂皮醛作用于B16细胞48h后，对细

7、胞迁徙能力的影响。8采用流式细胞(Flowcytometry,FCM)检测6}tg／ml对羟基桂皮醛作用于B16细胞6h、12h、24h和48h后，对细胞凋亡率以及细胞周期分布的影响。9采用免疫印迹技术(Westernblot)检测MAPK信号转导通路中P．P38、p-JNK和p-ERKl／2在对羟基桂皮醛诱导B16细胞分化过程中的作用。10通过Realtime方法检测6}tg／ml的对羟基桂皮醛分别作用于B16细胞中文摘要6h、12h、24h后，分化相关基因c。myc、Tyr、Trpl和Trp2表达的变

8、化。结果：l对羟基桂皮醛、松柏醛、对羟基苯甲醛、3。甲氧基对羟基苯甲醛和ligballinol等九种单体化合物对B16细胞的生长有不同程度的抑制作用，其中对羟基桂皮醛的效果最明显，与各组比较，差异具有统计学意义(尸