osmads59、osddl基因的水稻转化及osmads59在ostfl2 rnai转基因水稻中的表达分析

《osmads59、osddl基因的水稻转化及osmads59在ostfl2 rnai转基因水稻中的表达分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号土UDC$336学学校代码10593学号1031302001彦商犬学位论文OsMADS59、OsDDL基因的水稻转化及OsMADS59在OsTFL2RNAi转基因水稻中的表达分析赵逢哲专业名称作物遗传育种学院名称农学院指导教师刘芳副教授申请学位级别硕士论文提交日期2013年6月论文答辩日期2013年5月学位授予日期2013年6月答辩委员会主席李容柏研究员论文评阅人双盲评审论文评阅人双盲评审／嗍广西大学学位论文原创性和使用授权声明本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果

2、。除已特别加以标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均己在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或

3、其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于：口保密，在年解密后适用授权。回不保密。(请在以上相应方框内打“√’’)论文作者签名：灰龟咎指导教师签名：叫芳作者联系电话：18648801724日期：2013年6月20日日期2013年6月20日电子邮箱：285926198@qq．tom广西大学硕士掌位论文OsM删9，仉加E基因的水稻转化及伪^纠D．Sl，9在份野Z2RN～转基因水稻中的表达分析OsMADS59、OsDDL基因的水稻转化及OsMADS59在OsTFL2RNAi转基因水稻中的表达分析摘要植物的

4、生长发育过程受到众多基因的调控作用的影响。在拟南芥开花调控网络中，开花抑制基因FLC处于枢纽地位。FLC属于MADS盒基因。在水稻基因组中，和拟南芥FLC同源性最高的是OsMAD鼬9。鉴于生物进化的保守性和拟南芥FLC基因的重要功能，研究OsMAD盯9在水稻中的功能及它与其它开花调控基因的关系，具有重要意义。本研究利用农杆菌介导法，将OsMAD甾9过表达和RNAi载体转化入水稻植株，为研究0，?I刎D盯9的生物学功能提供材料。同时利用原位杂交方法，研究OsMAD跖9在TFL2RNAi转基因水稻中的表达，

5、旨在研究删D彤9与TFL2之间的调控关系。此外，本研究还构建了一个新基因侥fDD￡的RNAi载体，该基因可能参与水稻的开花调控，获得OsDDLRNAi转基因水稻植株，为最终探明其生物学功能奠定了基础。本研究的主要结果如下：1、获得伪^别D．S59过表达和OsMAD野9RNAi转基因水稻植株。本试验采用农杆菌介导的方法，通过对水稻农垦58进行胚的愈伤组织的诱导，用经过Ds^别D．S锣过表达载体和RNAi载体转化的EHAl05农杆菌对愈伤组织材料进行侵染，在500mg／L的潮霉素浓度下，对抗性愈伤组织进行筛

6、选，OsMAD盯9过表达愈伤组织分化出15株抗性植株，经PCR检测，最终获得转基因阳性植株共13株；OsMAD髓9RNAi愈伤组织分化出33株抗性植株，经PCR检测，最终获得转基因阳性植株共22株。2、本研究中，以TFL2RNAi转基因水稻农垦58(58NTRI)作为试验材料，以水稻农垦58作为对照(58NCK)，分别在水稻生长至第27天和第54天时，取叶片和茎尖为材料，进行RNA原位杂交试验，研究结果表明：随着水稻生长时间的延长，58NCK的叶片和茎尖分生组织中删D鼬9的表达量明显增加；而在58NTR

7、I的叶片和茎尖分生组织中，体坛4D黔9的表达量明显降低。广西大掌硕士掌位论文OsMADS59．OsDDL基因的水稻转化及OsMADS59在伙阡Z2IⅢAi转基因水稻中的表达分析3、成功构建OsDDL的RNAi载体。从水稻日本晴的基因组DNA中扩增出OsDDL的RNAi片段，经过在pUCm．T载体上的克隆，将RNAi片段在176载体上反向连接，从而完成RNA干扰结构的构建，最后将RNA干扰结构连接于plCAMBIAl300上，经序列测定，比对结果完全正确，从而完成了OsDDLRNAi载体的构建。4、用经过

8、OsDDLRNAi载体转化的EHAl05农杆菌对愈伤组织材料进行侵染，从愈伤组织中分化出14株潮霉素抗性植株，经PCR检测，最终获得转基因阳性植株共11株。关键词：水稻；MADS；TFL2；原位杂交；转基因广西大掌硕士学位论文伪^别D．S59，OsDDL基因的水稻转化及D，^纠D．S，9在Os阡配I斟Ai转基因水稻中的表达分析RiceTransformationofOsMADS59、osDDLGenesandAnalysisofExpres