微囊化小鼠胰岛经腹腔移植治疗小鼠糖尿病的研究

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1、万方数据答辩委员会主席：篡!望虱i堡答辩委员会成员：万方数据温州医科大学硕士学位论文目录目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11第一部分小鼠胰岛的分离纯化及培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．1仪器和材料1．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．2．1小鼠胰岛细胞的分离纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．2．1．1试剂的配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131

2、．2．1．2小鼠胰岛分离纯化程序⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．2．1．2．1小鼠胰岛细胞的分离⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．2．1．2．2小鼠胰岛细胞的纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．2．1．3胰岛计数⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．2．1．4扫描电镜观察纯化后小鼠胰岛外形及被膜情况⋯151．2．1．5胰岛活率检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．2．1．6胰岛的培养1．2．1．7体外静止葡萄糖刺激胰岛素释放实验⋯⋯⋯⋯⋯151．3统计学分析1．4实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯鬯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16．2．万方数据温州医科大学硕士学位论文lfillIIIIl

3、lIFIfUIJllllIJIY29147461．4．1小鼠胰岛的质量评价⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯161．4．1．1胰岛形态⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯．161．4．1．2胰岛数量、当量和纯度⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯161．4．1．3胰岛的活率⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯171．4．1．4体外静止葡萄糖刺激胰岛素释放实验⋯⋯⋯⋯⋯171．5讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18第二部分小鼠糖尿病模型的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯192．1仪器和材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯192．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯192．2．1试剂溶液的准备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯192．2．2实验动物的选择⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2O．2．2．3糖尿病小鼠的造模流程⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202．3实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202．3．1造模成功糖尿病小鼠的特征⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202．3．2造模成功率⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202．4讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21第三部分微囊化胰岛细胞的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯223．1仪器和材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯223．2实验方法⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯233．2．1海藻酸钠的纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯233．2．2溶液的配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23．3一万方数据温州医科大学硕士学位论文3．2．3微囊的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯243．2．4微囊的质量评价⋯⋯．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯243．2．5胰岛微囊的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯243．3统计学分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯253．4实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯253．4．1光镜下APA-Ba微囊形态⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯253．4．2

6、微囊膜表面的评价⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯253．4．3冻干法微囊膜厚度测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯253．4．4胰岛微囊化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯263．4．4．1APA-Ba微囊化胰岛形态⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯263．4．4．2微囊化胰岛的活率检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．’⋯．．273．4．4．3微囊化胰岛的胰岛素释放试验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯273．5讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27第四部分微囊化胰岛细胞小鼠腹腔内移植及疗效观察⋯⋯⋯⋯294．1仪器和材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯294．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯304．2．1实验动物的分组⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯304．2．2微囊化胰岛的腹腔移植⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯304．2．2移植后疗效评价及移植物观察⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯304．2．3．1日常监测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯304．2．3．2口服糖耐量试验(OGTT)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30．4．万方数据温州医科大学硕士学位论文4．3统计学分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯304．4实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯304．4．1移植后小鼠血糖变化结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3