微囊化大鼠胰岛与睾丸sertoli细胞联合移植实验研究

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1、微囊化大鼠胰岛与睾丸Sertoli细胞联合移植实验研究作者：周海丰范玉宏石小宁周毅【摘要】目的：应用细胞微囊化方法、病理技术研宄微囊化大鼠胰岛细胞与睾丸Sertoli细胞联合移植对糖尿病小鼠血糖的影响及Sertoli细胞对共移植的胰岛细胞的免疫豁免作用。方法:将30只小鼠随机分为2组，每组15只。第一组为胰岛细胞微囊化移植组，第二组为胰岛细胞与睾丸Sertoli细胞联合微囊化移植组，建立糖尿病模型后，两组均采用腹腔注射的方法将微囊植入糖尿病小藏体内，术后两组均不使用免疫抑制剂，定期检测小鼠的血糖情况，比较两组之间胰岛细胞有功能存活时间的不同以及微囊的病理学改变。结果:胰岛细胞与睾丸Sert

2、oli细胞联合微囊化移植组与胰岛细胞微囊化移植组相比，联合移植组胰岛细胞存活时间长于单纯移植组（P【关键词】大鼠；微囊化;Sertoli细胞;移植;胰岛;免疫豁免[ABSTRACT]Objective:ToinvestigatetheimmuneexemptionforisletgraftsinducedbycotransplantedtesticularSertolicellsinratsandeffectonbloodatisletcelglucosebycolandtesticmicroencularsertolapsulatedricellthroughmicrocapsulati

3、onandpathyologic:Thirtymicewererandomlydividedinto2groupswithl5ineachinthefirstgroupweretransplantedmicrocapsulatedisletandthatinthesecondgroupweretrasplatedmicrocapsulatedisletandtesticularsertolimicrocapsuleswerealltransplatedintoabdominalcavityofdiabeticrecipientformiceoftwowasnotappliedandbloo

4、dglucosewasdetectedafteroperationsoastocomparedifferentsurvivaltimeandpathologicalterationof:Thesurvivaltimeofisletin2groupswastimeofcotransplantationwaslongerthanthatofsimplecotransplantation(P【KEYWORDS】Rats,Microencapsulation,Sertolicell,Transplantation,Isletsof1angerhans糖尿病是一组以慢性血糖（血葡萄糖）水平增高为特征

5、的代谢疾病群，久病可引起多系统损害导致眼、肾、神经、心脏、血管等组织器官的慢性进行性病变，引起功能缺陷和衰竭。目前临床上糖尿病的治疗方法（口服降糖药、皮下注射胰岛素、胰腺移植）大都是外源性补充胰岛素，不能长期而稳定的维持血糖在正常范围内，也不能降低并发症的发生率，本实验利用微囊包被技术，联合移植胰岛细胞和睾丸Sertoli细胞，与对照组(单纯移植微囊化胰岛细胞)作比较，探讨联合移植中Sertoli细胞对共移植的胰岛细胞的免疫豁免作用，以及Sertoli细胞在移植受体内减轻囊周受体淋巴细胞侵润的情况。1材料与方法动物与试剂30只小鼠(BALB/C)(雌性)，每只平均体重为(20±5)g;Wi

6、star雄性大鼠20只，(200±10)g;胰岛细胞，睾丸Sertoli细胞分离及培养试剂(CollagenaseV，Dnasel，Streptozocin，EDTA，HBSS1X，TrisHCL，Exendin4，所需试剂均由哈尔滨医科大学细胞移植实验室提供)，微囊发生器(自制)，二氧化碳孵箱(BB506OHeraeus)。实验方法30只小鼠分2组，每组15只。实验组：应用CollagenaseV插管法分离得到的大鼠胰岛样细胞簇［1］和采用胶原酶V、胰蛋白酶、DNaseI二次消化法获得的Sertoli细胞［2］按照1:(35〜50)的比例联合包入微囊，将(2000±100)个微囊移植入每

7、只STZ诱导的糖尿病小鼠模型［3］腹腔内；对照组:大鼠胰岛样细胞簇单独制囊，将(2000±100)个微囊移植入每只糖尿病小鼠模型腹腔内，两组术后均不使用免疫抑制剂。监测指标移植术后每天监测小鼠的血糖及病死率并记录术后12h经断尾法测小鼠血糖浓度，以后每天测血糖浓度，非空腹血糖浓度＜/L持续2d以上作为移植物有功能存活的标准，移植次日起第一周每天测血糖一次，以后每周3次，出现第一次血糖浓度的时间为排斥时间，连续两次＞/L作