微囊化大鼠胰岛与睾丸sertoli细胞联合移植实验研究论文

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1、微囊化大鼠胰岛与睾丸Sertoli细胞联合移植实验研究论文周海丰范玉宏石小宁周毅【摘要】目的：应用细胞微囊化方法、病理技术研究微囊化大鼠胰岛细胞与睾丸Sertoli细胞联合移植对糖尿病小鼠血糖的影响及Sertoli细胞对共移植的胰岛细胞的免疫豁免作用。方法:将30只小鼠随机分为2组，每组15只。第一组为胰岛细胞微囊化移植组,第二组为胰岛细胞与睾丸Sertoli细胞联合微囊化移植组,建立糖尿病模型后，两组均采用腹腔注射的方法将微囊植入糖尿病小鼠体内,术后两组均不使用免疫抑制剂,定期检测小鼠的血糖情况,比较两组之间胰岛细胞有功能存活时间的不同以及微囊的病理学改变。结果:胰岛细胞与睾丸Se

2、rtoli细胞联合微囊化移植组与胰岛细胞微囊化移植组相比,联合移植组胰岛细胞存活时间长于单纯移植组(P0.05),囊周淋巴细胞侵润程度轻于单纯胰岛细胞移植组。结论：睾丸Sertoli细胞对共移植的胰岛细胞具有免疫豁免作用,可以延长胰岛细胞有功能存活时间,减轻排斥反应,降低囊周淋巴细胞侵润程度。【关键词】大鼠;微囊化;Sertoli细胞;移植;胰岛;免疫豁免【ABSTRACT】Objective:ToinvestigatetheimmuneexemptionforisletgraftsinducedbycotransplantedtesticularSertolicellsinrats

3、andeffectonbloodglucosebycomicroencapsulatedratisletcellandtesticularsertolicellthroughmicrocapsulationandpathyologicteology.Methods:Thirtymicelydividedinto2groupsicrocapsulatedisletandthatinthesecondgroupicrocapsulatedisletandtesticularsertolicell.Themicrocapsulesinalcavityofdiabeticrecipien

4、tformiceoftmunosuppressanteandpathologicalterationofmicrocapsule.Results:Thesurvivaltimeofisletin2groupseofcotransplantationplecotransplantation(P0.05)andinfiltratedextentforlymphocyteofcapsulatedperipheryinmiceofgroup2oregentlythanthatingroup1.Conclusion:TesticularSertolicellcaninduceimmuneexe

5、mptionforcotransplantedislet;prolongthesurvivaltimeofisletpalliaterejectionanddegradeinfiltrationextentoflymphocyteofcapsulatedperiphery.【KEYicroencapsulation,Sertolicell,.freelmol/L持续2d以上作为移植物有功能存活的标准,移植次日起第一周每天测血糖一次，以后每周3次,出现第一次血糖浓度≥11.1mmol/L的时间为排斥时间,连续两次≥11.1mmol/L作为移植物丧失功能的指标。1.3.2小鼠移植物(微

6、囊)、内脏的病理学(HE染色)观察。1.4统计学分析结果以(x±s)表示,组间比较采用t检验。2结果2.1至实验结束，对照组及实验组各存活5只小鼠。胰岛细胞与睾丸Sertoli细胞共同培养3d后,胰岛贴附于Sertoli细胞生长,随着培养时间的延长,有大量的细胞从胰岛边缘增殖出来,导致原有的团状结构消失,在Sertoli细胞表面形成一层甚至数层细胞。联合培养组胰岛素的分泌量高于单独培养组,胰岛素的含量保持在较稳定的水平,下降缓慢。2.2微囊化胰岛及微囊化胰岛与Sertoli细胞联合移植后受体的血糖变化移植后第一天内每隔12h经断尾法测小鼠血糖一次,结果表明刚植入的微囊并没有发挥调节血

7、糖的作用,移植后第二天两组血糖均11.1mmol/L(2组均未使用胰岛素)，对照组在7d后血糖值11.1mmol/L;实验组在移植后第20天出现血糖升高，与对照组相比,Sertoli细胞促进了胰岛细胞分泌胰岛素及胰岛细胞的分化,对共移植的胰岛细胞产生了免疫豁免作用,延长了胰岛细胞有功能存活的时间(表1～2)。表1二组培养液中胰岛素浓度的比较表2移植物存活时间注：与对照组相比*P0.052.3微囊肉眼及病理观察肉眼所见将移植后血糖连续2次11.1mmol/L