2005mrna差异显示pcr的研究进展

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1、维普资讯http://www.cqvip.com第2O卷第2期北京农学院学报V01．2O．No．22005年4月JoURNALoFBEIJINGAGRICULTURALCOLLEGEApr．，2005mRNA差异显示PCR的研究进展安健，汪明，王黎霞，杨静。，夏茂华。(1．北京农学院动物科学技术系，北京102206；2．中国农业大学动物医学院，北京100094；3．北京动物园，北京100044)摘要：mRNA差异显示PCR技术是在基因转录水平上研究差异表达和性状差异的有效方法之一，该方法在生物的发育、性状和对各种生物、理化因子作用时应答过程基因表达的研究中应用

2、十分广泛，笔者简述了mRNA差异显示PCR技术的基本原理、技术改进以及此技术在球虫抗药性研究中的应用。关键词：mRNA差异显示PCR；球虫；抗药性中图分类号：$852．72文献标识码：A文章编号：1002—3186(2005)02—0064—05mRNADifferentialDisplayandItsApplicationonDrug-ResistanceofCoccidiaANJian，WANGMing“，WANGLi—xia，YANGJing。．XIAMao—hua。(1．BeiiingAgriculturalCollege，Beiiing102206；

3、2．ChinaAgriculturalUniversity，Beijing100094；BeijingZOO，Beijing100044)Abstract：ThemRNAdifferentialdisplayisanewtechniquetoclonegenesofdifferentialexpressingofthediversityorganism．Thetechniqueiswidelyusedinthediversityorganismonthedevelopmentcelldivi—sion，differentiation，metabolismand

4、theresponsetothepathogen．Themechanism，themethod，thede—velopmentandimprovementoftheapplicationofthetechniquearealsoreviewedandprospectedinthepa—per．TheapplicationofthetechniqueinCoccidiandrug-resistanceisintroduced．Keywords：mRNAdifferentialdisplayPCR；Coccidia；drug—resistance生物的性状和生物对

5、各种生物、理化及致病因不需要纯化的mRNA，操作简便、快速、灵敏等优子的应答，本质上都是基因在时间上或空间上选择点E4-7]，故已被许多生命科学实验室作为一种重要性表达，即基因的差异表达的结果，因而，获取差异工具，应用于体内和体外差异表达基因的筛选，研究表达的基因信息，将有助于了解生物的生理变化和基因功能【8]。现将mRNA差异显示PCR技术原病理改变的分子机制n]。研究基因差异表达主要技理、改进和提高及在球虫抗药性研究中的应用作简术有：消减文库筛选、差异杂交、代表性差异分析、基要综述。因表达序列分析、电子消减技术[2和mRNA差异显1mRNA差异显示PCR技

6、术的主要示PCR技术等(mRNADifferentialDisplayPCR，简称DD-PCRE。)。原理迄今为止，上面的几种方法已成功地用于基因在生命过程的某一时期，生物细胞转录和表达差异表达的研究。尤其是mRNA差异显示PCR技的基因只有很少一部分，而且在不同的发育阶段、不术，虽然发明只有短短十几年，已经取得了令人瞩目同的生理状态和不同类型细胞的基因转录和表达也的科研成果，原因是它具备需要总RNA的量极少，不尽相同，因此，研究mRNA的差异，相对于研究收稿日期2004—14—10；修订日期：200501—15基金项目国家科技攻关计划项目(项目编号：2002

7、BA514A一17—01)，北京市自然科学基金资助项目(项目编号：6032008)，北京市委组织部优秀人才资助项目作者简介安健，男，1968年出生，副教授，研究方向为畜禽疫病防治及分子生物学；*通讯作者维普资讯http://www.cqvip.com2005年第2期安健等：mRNA差异显示PCR的研究进展65DNA差异，排除了内含子的影响，使研究更接近于2．1．4操作简单快捷差异显示PCR技术操作简生命活动的实质。mRNA差异显示PCR技术是根单快捷，从RNA的纯化，差异显示PCR、差异电泳、据真核生物细胞中绝大多数mRNA均带有3polyA差异带分离纯化，差

8、异鉴定、阳性结果的序列分析，尾的结构特