血浆甲基化表型在非小细胞肺癌中的临床价值

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1、中图分类号血浆甲基化表型在非小细胞肺癌中的临床价值TheclinicalvalueofCpGislandmethylatorphenotypeinplasmaofnon-smalllungcancer计：学位论文：50页表格：11个插图：5幅尹宏飞指导教师：雷霆教授申请学位级别：硕士学位学科(专业)：外科学培养单位：大连医科大学附属第一医院完成时间：二O一三年五月答辩委员会主席：独创性声明～娜本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在指导教师指导下进行的研究工作及所取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发

2、表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：——年——月——日关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框

3、内打“4”)：作者签名：导师签名：1．保密口，在年解密后适用本授权书。2．不保密口。日期：年月日年月日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．5(二)Vt料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．9(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．16(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．22(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．28(六)展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29(七)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．3O三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．35(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．43四、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5o大连医科大学硕士学位论文血浆甲基化表型在非小细胞肺癌中的临床价值硕士生姓名：指导教师：指导小

5、组：专业名称：尹宏飞雷霆教授谭庆伟教授外科学摘要目的：本课题通过检测非小细胞肺癌患者肿瘤组织及血浆的一组基因(包括P16州“8，MGMT，RAR—p基因)的CpG岛甲基化表型(CIMP)，同时检测肺部良性疾病组织及血浆作为对照，分析其与患者临床资料有无相关性，与良、恶性疾病有无相关性，与预后是否存在相关性，从而评价血浆CIMP是否有可能作为肺癌早期诊断、鉴别诊断、提示预后的一种无创性指标。方法：45例肺癌新鲜病理标本组织取自大连医科大学附属一院2011年至2012年间的手术切除标本，每例均取癌组织及切缘组织(距肿瘤边缘5am以上的正常肺

6、组织)，标本于手术切除后半小时内于液氮中保存后转至一80℃电冰箱中，所有患者术前均未接受放化疗。与之配对的血浆标本，术前空腹采集研究对象的外周静脉血2ml于内有EDTA的抗凝真空采血管，使用微型离心机3000rpm，离心1Omin，抽取上清的血浆，转入液氮中保存后转至-80℃电冰箱中。将25例肺部良性疾病的组织标本、血浆标本作为对照组。并对实验组患者随访1．5年。将标本提取DNA后，大连医科大学硕士学位论文甲基化处理，使用甲基化特异性PCR扩增甲基化处理后的样本DNA，在2％的琼脂糖凝胶上电泳，在紫外线下观察结果。3种基因甲基化中2项以

7、上阳性即为(CIMP+)，小于2项则为(CIMP-)。使用统计学SPSS软件，分析实验组CIMP情况与临床资料的关系，实验组与对照组CIMP情况的关系，实验组CIMP情况与预后的关系。结果：实验组的肿瘤标本，29例为CIMP+，i6例为CIMP一；与其相应的血浆中，有24例为CIMP+，21例为CIMP-；25例肺部良性疾病患者中仅l例出现组织及血浆中CIMP型为阳性，其余均为阴性。肿瘤组织和血浆的CIMP情况具有较好的一致性(Kappa=O．59)。对于肿瘤组织的CIMP与年龄，性别，吸烟，肿瘤的大小，淋巴结的转移，组织学分型，分化程

8、度以及TNM分期无明显关系(P>0．05)。但对于血浆的CIMP，其与淋巴结转移的状态有明显差异(P