cd133及cd166在脑膜瘤中的表达及临床意义

《cd133及cd166在脑膜瘤中的表达及临床意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、南方医科大学2010级硕士学位论文CDl33及CDl66在脑膜瘤中的表达及临床意义TheexpressionandclinicalsignificanceofCD133andCDl66inmeningiomas课题来源：自选学位申请人导师姓名专业名称培养类型培养层次所在学院朱震成余力肿瘤学专业学位型硕士南方医科大学珠江医院2013年5月28日广州

2、IIIl[1lIIIJillIllllIIIlY2405682硕士学位论文CD133及CD166在脑膜瘤中的表达及临床意义日Y，L■、，、硕士研究生：朱震威指导教师：余力教授摘要一、研究背景传统的观点认为肿瘤的发生是

3、一个多步骤的过程，涉及到外界因素的刺激、癌基因的激活、抑癌基因的失活等一系列的过程。但人们在研究大肠癌时发现，肠道上皮细胞存活期短，没有足够的时间积累基因突变引起肿瘤，因此研究人员把目光投入到能够长期存在未分化的干细胞而不是己分化的肿瘤细胞。1997年Bonnet等⋯分离出人急性粒细胞白血病干细胞，发现仅占0．2％的具有CD34+CD38-表型的肿瘤细胞能够使NOD／SCID小鼠体内形成瘤，而其它表型的大部分细胞无法形成肿瘤。2001年Reya等晗3首次提出了肿瘤干细胞(TSC)学说，认为肿瘤组织中存在少量具有自我更新、无限增殖和多向分化潜能的肿瘤干细胞，它在

4、肿瘤组织中所占比例虽然很少，却与肿瘤起源、发展、转移、放化疗抵抗关系密切∞。51，而其它大部分肿瘤细胞经过几代短暂的分化后最终死亡。随后陆续在大肠癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌等各种实体肿瘤中培养出肿瘤干细胞，并对其细胞标记物、生物学特性进行了研究。现在比较公认的脑肿瘤干细胞(BTSCs)表面标记物是细胞表面粘附分子CDl33阳1。Singh等口3培养出神经干细胞球，接种100个CDl33阳性细胞使NOD／SCID小鼠致瘤，所形成的肿瘤与原肿瘤表型一致。但随着肿瘤干细胞研究的进展，研究人员发现CDl33作为肿瘤干细胞具有一定局限性。Myung和Woolard等陋1研

5、究发现大约40％新鲜分离的胶质母细胞瘤标本并不表达CDl33阳性肿瘤细胞；摘要Wang等阳3发现胶质瘤中存在部分CDl33阴性的肿瘤细胞仍具有致瘤性，在此研究中发现CDl33阴性细胞具有分化为CDl33阳性细胞的能力，因此认为此类CDl33阴性细胞也为脑肿瘤干细胞(BTSCs)。2011年Rath，P等¨03培养鉴定出脑膜瘤干细胞，并对其表面标记物进行了研究，认为CDl33并非仅有的脑肿瘤干细胞的标记物，白细胞粘附因子CDl66也是一种有价值的干细胞标记物。脑膜瘤是一种常见的颅内肿瘤，约占颅内肿瘤的20％n¨，以手术治疗为主，90％脑膜瘤为WHOI级，WItO

6、II脑膜瘤约占4．6％-7．2％，WHOIII脑膜瘤约占1％-3％n2l。脑膜瘤的术后复发和转移是影响患者预后的关键。脑肿瘤干细胞标记物CDl33及CDl66为抗肿瘤治疗提供了新思路和可能的治疗靶点。前期大量的文献证实，CDl33和CDl66表达水平和多种肿瘤预后密切相关，是肿瘤预后相关因素之一。本研究应用免疫组织化学法检测脑膜瘤组织中干细胞标记物CDl33和CDl66的表达，探讨肿瘤组织中CDl33和CDl66阳性细胞分布情况和临床意义，以及CDl66作为脑膜瘤干细胞的标记物的可行性。二、研究目的本研究采用免疫组化学技术，对比观察CDl33与CDl66在不同

7、级别脑膜瘤中的表达，探讨两者相关性及临床意义，为脑膜瘤诊断、治疗寻找更好的靶点。三、实验过程1材料和方法1．1临床资料80例脑膜瘤样本来源于珠江医院病理科2006年至2009年保存的石蜡标本。均经病理学专家确诊，按照WHO(2007)脑肿瘤分类标准进行分类、分级，其中I级脑膜瘤33例；II级44例，其中非典型脑膜33例，其它11例；III级3例，均为问变性脑瘤。按级别分为两组，I级脑膜瘤为低级别，II-III级脑膜瘤为高级别。1．2试剂及免疫组化方法CDl66兔抗人多克隆抗体(北京博奥森公司)，CDl33兔抗人多克隆抗体(北京中杉金桥公司)，及免疫组化试剂盒(

8、Biogenex公司)。标本经10％福尔马林溶液固定，石蜡包埋，切片的厚度为5um，脱蜡水化，修复抗原。操作严格按照说明书进行。每批染色以结肠癌标本作为CDl33II硕士学位论文和CDl66的阳性对照，以PBS液代替一抗体作为阴性对照。1．3结果判断标准CDl33及CDl66阳性表达为定位于细胞膜及细胞质，出现棕黄色且高出背景色。肿瘤组织的整体阳性表达程度用棕黄色物质的积分光密度(IOD)值表示。图像定量分析的过程：高倍镜(400×)下随机选择lO个视野，使用Image-ProPlus6．0病理图像分析软件计算出阳性细胞IOD值。2实验步骤石蜡切片经过脱蜡和水

9、化后，对组织进行高压锅热修复。自然状态