雌激素及其受体与卵母细胞成熟的相关性

《雌激素及其受体与卵母细胞成熟的相关性》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：R71单位代码：10752密级：公开学号：2010166宁夏医科大学硕士研究生学位论文雌激素及其受体与卵母细胞成熟的相关性EstrogenandEstrogenReceptorWereAssociatedwithOocytesMaturation学位申请人：李伊然指导教师：李际春教授／陈子江教授合作指导教师：千日成教授申请学位门类级别：医学专业名称：妇产科学研究方向：生殖医学所在学院：临床医学院论文完成日期：二零一三年四月宁夏医科大学研究生部NingxiaMedicalUniversityThesisforApplicationofMaster’sD

2、egreeEstrogenandEstrogenReceptorWereAssociatedwithOocytesMaturationStudent’sName:LiYiranSupervisor：LiJichun/ChenZijiangAssistantSupervisor:Ri-chengChianSubjectCategory:MedicineMajor:Gynaecology&ObstetricsSpecialty:ReproductionSchool:ClinicalMedicineCompletionDate:2013.04宁夏医科大学学位论文独

3、创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日论文使用授权的声明宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权宁夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数

4、据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要雌激素及其受体与卵母细胞成熟的相关性摘要目的通过测定取卵日人血清及卵泡液内雌二醇水平、卵丘细胞雌激素-β受体mRNA的表达，探讨卵泡液雌激素浓度与卵丘细胞E2-β受体mRNA的表达量的关系和卵母细胞成熟与卵丘细胞-β受体mRNA的表达量的相关性；通过观察雌激素G蛋白偶联受体GPR30在小鼠卵母细胞上的表达定位和不同时期的表达量

5、以及体内成熟和体外成熟的卵母细胞表达量的比较，探讨GPR30对小鼠卵母细胞成熟调控作用和对卵母细胞体内、体外成熟调控作用的差异。为探索体外环境和体内微环境下雌激素通过调控雌激素受体的表达进而控制卵母细胞发育和凋亡的机制，调节控制卵母细胞的静止、启动及发育成熟提供理论依据。方法选择因男性不孕行单精子卵母细胞胞质内注射（ICSI）治疗的的患者34例，研究对象的一般资料：见附表1，所有研究对象的一般资料无差异性。在取卵日收集外周血、卵泡液及卵丘细胞，分别测定雌二醇浓度和ER-βmRNA的表达量，采用电化学发光法（ECLIA）检测血清及卵泡液中雌二醇（E2）的水平，

6、采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Realtime-PCR）检测卵丘细胞ER-βmRNA的表达量，并记录卵母细胞成熟度并进行相关性分析。选择CD1系鼠龄为8－10周的雌性老鼠作为研究对象，通过促排卵方法获取小鼠体内成熟的卵母细胞（MII期），从无任何药物刺激的小鼠获得未成熟卵母细胞（GV期）经体外成熟培养（IVM）发育至成熟卵母细胞（MII期）和老化卵母细胞（Aging期）。采用激光共聚焦扫描显微镜（LSM）获取二维和三维（2D、3D）的显微镜图片，鉴定GPR30在小鼠卵母细胞内的定位并测定其表达量。运用蛋白质免疫印迹的方法，鉴定不同成熟度卵母细胞膜组分中GP

7、R30蛋白的表达量。一宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要结果(1)取卵日每卵泡平均血清E2水平与卵泡液中E2水平呈正相关（P=0.002）。（2）MⅡ期卵母细胞内卵泡液E2水平显著高于MⅠ期和GV期卵母细胞水平，差异有统计学意义P<0.01。（3）MⅡ期卵母细胞的卵丘细胞中ER-βmRNA的表达量是MⅠ期的2.74倍（P<0.01），是GV期的3.51倍（P<0.01）。卵丘细胞的ER-βmRNA的表达量与卵泡液内雌激素浓度呈正相关（4）GPR30为小鼠卵母细胞特异性的雌激素膜受体，在小鼠不同发育时期的卵母细胞均有表达（5）不同成熟期的卵母细胞，GPR3

8、0表达量不同，各期表达量比较有显著性差异（P<0.0