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《植物安全性表达载体的构建策略_以_省略_达水稻反义蜡质基因的载体构建为例_杨丽君》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、分子植物育种，2009年，第7卷，第5期，第1027-1031页MolecularPlantBreeding,2009,Vol.7,No.5,1027-1031新思路、新技术、新方法NovelThinking&Technology植物安全性表达载体的构建策略：以表达水稻反义蜡质基因的载体构建为例杨丽君1,2戎益泉1,2张善明1李建粤1*1上海师范大学生命与环境科学学院,上海,200234;2上海医药高等专科学校,上海,201318*通讯作者,lijianyue01@yahoo.com.cn摘要基于转基因作物的安全性考虑，在用于转化的表达载体上除了含有目的基因以及控制该目的基因表达的启动子和终
2、止子外，最好不存在其它有可能存在安全性争议的DNA序列，由此培育的转基因植物可能将更易于被消费者所接受。本研究以pCAMBIA1300载体为基础，基因操作去除pCAMBIA1300质粒上的潮霉素抗性基因和花椰菜花叶病毒的35S启动子序列，构建了两种只含有水稻蜡质基因启动子引导蜡质基因反义片段的表达载体，p13AWY-1和p13AWY-2。其中p13AWY-1表达载体含有一个由水稻蜡质基因启动子、第一内含子、反义蜡质基因(Waxypro+intron1+anti-Waxy)的融合基因单元；而p13AWY-2表达载体含有两个正向排列的Waxypro+intron1+anti-Waxy融合基因单元
3、。我们通过构建水稻反义蜡质基因安全性表达载体，试图为植物安全性表达载体的构建提供一种思路，为今后大规模商业化采用转基因技术改良农作物遗传特性提供安全的转基因方法。关键词转基因植物,植物表达载体,生物安全性,35S启动子,抗生素标记,水稻StrategyforBuildingSafePlantExpressVector,anExampleofConstructforExpressingRiceAnti-WaxyGeneYangLijun1,2RongYiquan1,2ZhangShanming1LiJianyue1*1CollegeofLifeandEnvironmentScience,Sha
4、nghaiNormalUniversity,Shanghai,200234;2ShanghaiInstituteofHealthSciences,Shanghai,201318*Correspondingauthor,lijianyue01@yahoo.com.cnDOI:10.3969/mpb.007.001027AbstractInviewofthebiosafetyofgeneticallymodifiedcrops,theideaconstructusedforplantgenetictrans-formationshouldonlycontainexpressionelements
5、suchastargetgene,promoterandterminator,whichwouldbenecessaryforexpressingthetargetgene.AndalsoitisstrongrecommendedthatthebiosafeconstructshouldhavenoanyuncertainelementandexogenousDNAsequencesuchasantibioticsgene,35Spromoteretc.Itisnodoubtthatthetransgenicproductsdevelopedbyusingsafetyexpressionco
6、nstructmightbeincreasingacceptedbycon-sumer.Inthisstudy,weputforwardastrategyforbuildingakindofsafetyplantexpressionconstructbyremovingbothofhygromycinresistantgeneandthecauliflowermosaicvirus35Spromoter,andthenwedevelopedtwoex-pressconstructsonthebasisofplasmidpCAMBIA1300,namedp13AWY-1andp13AWY-2.
7、Theexpressionele-mentswerecombinedasafusionuniti.e.Waxypro+intron1+anti-Waxyandplacedinthep13AWY-1construct,whilethetwoforwardarrangedfusionunitsplacedinthep13AWY-2construct.Inthisstudy,theinitialgoalweexpe
