东风桔有效部位化学成分及其活性研究

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1、广东药科大学硕士研究生学位论文分类号：___________密级：__________UDC：___________东风桔有效部位化学成分及其活性研究姓名：孙京京学号：2111548015院系：中药学院学位类型：学术学位专业：中药学研究方向：中药及复方化学成分研究导师：尹永芹教授论文提交日期：2018年5月25日论文答辩日期：2018年5月12日学位授予单位：广东药科大学二〇一八年五月广东药科大学硕士研究生学位论文StudyonChemicalCompositionandActivityofActivePartsofAtal

2、antiabuxifoliaCandidate：JingjingSunStudentID：2111548015Affiliation：SchoolofGuangdongPharmaceuticalUniversityAcademicDegreeApliedfor：MasterofChineseMateriaMedicaSpeciality：ChineseMateriaMedicaSupervisor：Prof.YongqinYinAssistantSupervisor：DayofDefence：May2018Degree-C

3、onferring-Institution：GuangdongPharmaceuticalUniversityMay2018广东药科大学硕士研究生学位论文广东药科大学硕士研究生学位论文东风桔有效部位化学成分及其活性研究摘要东风桔，又名酒饼簕（Atalantiabuxifolia(Poir).Oliv.），芸香科酒饼簕属植物。于《岭南采药录》记录在册，性凉，味微苦。有祛瘀止痛顺气化痰等功效。作为民间百姓常用药，在慢性阻塞性肺疾病（chronicobstructivepulmonarydisease,COPD）治疗上有较大的前景

4、。本文以细菌感染和吸烟，两大COPD的发病因素出发作为活性追踪及活性检验手段，将东风桔药材提取后经不同极性溶剂萃取得到石油醚（petroleumether）、氯仿（chloroform）、乙酸乙酯（ethylacetate）、正丁醇（n-butanol）部位进行抗菌及抗炎实验，从中寻找有效部位，并通过活性追踪，寻找可能存在有效单体化合物的馏分，进行分离纯化。得到的单体化合物通过UV、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱等化学分析手段，解析化合物结构，通过抗菌及16HBE细胞烟雾模型抵抗实验研究其活性。旨在寻找治疗COPD的可能有效部位

5、及有效单体化合物。实验内容及结果如下：（1）抗菌、抗炎有效部位筛选。以95%乙醇进行回流提取，浓缩成浸膏后纯化水分散。依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取。得到的四个极性部位分别用肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌三种可以引起COPD的致病细菌采用纸片法进行抑菌试验。研究结果表明，氯仿、乙酸乙酯、正丁醇部位对三种病菌有抑制效果，正丁醇部位对肺炎克雷伯菌抑制效果最为明显。抗炎实验通过香烟烟雾（CSE）刺激人支气管上皮细胞（16HBE），使其产生炎性反应，并通过高倍显微镜观察16HBE细胞及MTT法测细胞活力、测定T

6、NF-α等炎症因子变化，研究药物对香烟烟雾刺激的16HBE细胞产生的作用。结果表明，氯仿，乙酸乙酯和正丁醇部位对香烟烟雾刺激的16HBE细胞产生了保护作用，细胞存活率较模型组有显著增高，同时抑制了炎症因子的释放，其中乙酸乙酯部位高剂量组、正丁醇部位高、中剂量组效果呈显著性差异。I广东药科大学硕士研究生学位论文（2）乙酸乙酯部位和正丁醇部位化学成分研究。通过药理研究发现，乙酸乙酯部位和正丁醇部位有抗菌、抗炎作用，即为东风桔有效部位，所以选用乙酸乙酯部位、正丁醇部位继续进行活性追踪分离。以纸片法抗肺炎克雷伯菌及MTT法测定药物对

7、香烟烟雾诱导的人支气管上皮细胞死亡的影响作为活性追踪的方法。采用硅胶柱层析、ODS、MCI、凝胶柱色谱、HPLC、制备液相等方法对乙酸乙酯和正丁醇萃取部位进行分离纯化，并113利用H-NMR、C-NMR等波谱技术对得到的单体化合物进行结构鉴定。从中分离并鉴定得到17个单体化合物，分别为BuxifoliadineB（1）；BuxifoliadineA（2）；N-methylataphyline（3）；葡萄内酯（auraptene）（4）；Atalaphylline（5）；Severinolide（6）；acetylisoepi

8、atalantin（7）；trans-N-p-coumaroytyramine（8）；CitrusinineII（9）；CitrusinineI（10）；东风桔碱（11）；1,4,5-三羟基-3-甲氧基-10-甲基-吖啶酮（12）；glycofolinine（13）；Cycloseveri