去甲基化对香烟提取物所致小鼠肺气肿模型及内皮祖细胞功能和干细胞抗原-1表达的作用

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1、中图分类号UDC博士学位论文学校代码密级去甲基化对香烟提取物所致小鼠肺气肿模型及内皮祖细胞功能和干细胞抗原．1表达的作用Effectsofdemethylationontheemphysemaanimalmodel，endothelialprogenitorcells’functionandstemcellantigen一1’Sexpression作者姓名：何智辉学科专业：临床医学研究方向：内科学(呼吸内科)学院(系、所)：湘雅二医院指导教师：陈平教授中南大学二O一三年五月原创性声明

2、

3、IfllIPIIJdlIIIIPIIlUllIlliIIIIrIY2425354本人声

4、明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。储签名：年吐吼业年一L月二日学位论文版权使用授权书本入了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术

5、信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者张喇翩虢日期：丑年上L月三日本课题资助基金：国家自然科学基金(81070039)去甲基化对香烟提取物所致小鼠肺气肿模型及内皮祖细胞功能和干细胞抗原．1表达的作用摘要第一章5．杂氮．2’-脱氧胞苷对香烟提取物所致小鼠肺气肿模型和干细胞抗原．1表达的影响目的：探讨经腹腔注射香烟提取物(CigaretteSmokingExtract，CSE)所致肺气肿小鼠模型的建立，腹腔注射5．杂氮．2’．脱氧胞苷(5．aza．2’deoxycytidine，AZA)对肺气肿动物模型的保护作用和对干细

6、胞抗原一1(StemCellAntigen一1，Sca-1)表达的影响。方法：32只4．-．6周龄的雄性C57BL／6J小鼠随机分为正常对照组(N组)、AZA(A组)、CSE+AZA(AC组)及CSE(C组)，每组8只，定时定量腹腔注射CSE溶液／AZA溶液／PBS溶液，第28天处理四组小鼠，检测体重变化、Buxco系统及PLY3211小动物肺功能检测系统行肺功能检查、收集标本。肺组织病理切片苏木素一伊红(髓)染色后观察形态学改变并定量测定平均肺泡隔厚度(MAST)、平均内衬间隔(MLI)及肺泡破坏指数(DI)，肺组织TUNEL染色检测肺泡间隔细胞凋亡。将动物模型于造模第

7、28天处死，密度梯度离心法分离小鼠骨髓EPCs并培养7天，WesternBlotting检测各组EPCs及肺组织Sca．1蛋白表达，实时定量RT．PCR检测各组EPCs及肺组织Sca．1mRNA—4一、●表达。111结果：(1)(i)4组小鼠体重变化均无统计学差异(尸>0．05)。(ii)肺功能比较中，与正常对照组比较，AC组及C组小鼠气道阻力(Raw)显著增高衅O．01)，动态肺顺应性(Cdyn)、呼气峰流速(PEF)及吸呼比(Ti／Te)降低(氏O．05或P<0．01)，AC组和C组之间肺功能各指标无统计学差异(胗0．05)。陋)小鼠肺组织HE染色，形态学变化明显，C

8、组肺组织可见肺实质破坏，肺泡间隔断裂，肺泡壁变薄，肺泡腔融合、高度扩大，肺气肿明显。各组MAST比较：与N组比较，A组、AC组和C组MAST均显著降低(尸

9、显著增高(氏O．01)；与AC组比较，C组MAST增高(p