复方苗药对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

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1、《中国图书资料分类法》分类号：R774.13单位代码：10660学号：S100026贵阳医学院2013届硕士学位论文复方苗药对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究生：杨丹导师：余资江教授康朝胜副教授年级：2010级专业：人体解剖与组织胚胎学2013年5月1日目录摘要………………………………………………………………01前言………………………………………………………………02材料与方法…………………………………………………………03结果………………………………………………………………10讨论……

2、…………………………………………………………20参考文献……………………………………………………………25结论………………………………………………………………27研究生期间参与的课题及发表的论文…………………………28英文摘要……………………………………………………………29致谢………………………………………………………………31缩略词表……………………………………………………………32论文原创性声明……………………………………………………33附：综述…………………………………………………………342

3、013届硕士研究生学位论文复方苗药对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及其机制复方苗药对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及其机制专业名称：人体解剖与组织胚胎学研究生：杨丹指导老师：余资江教授康朝胜副教授摘要目的探索复方苗药对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法采用健康SD大鼠72只，随机分成3组：正常对照组、模型组、治疗组（五花血藤，透骨草，见血飞等组方灌胃），然后按照不同再灌注时间段分为2h、6h、12h、24h、48h、72h组，各组随机分配6只大鼠。通过HE、Nissl染色、透射电

4、镜观察各组大鼠视网膜各层细胞形态学变化；免疫组化和原位杂交方法检测治疗前后视网膜内各细胞层凋亡相关因子bcl-2、Bax、caspase-3和survive的表达。结果大鼠在高眼压后2h开始发生组织学改变，表现为神经节细胞、内丛状层水肿，少部分神经节细胞发生空泡变性，对照组均为正常视网膜结构，而治疗组在缺血再灌注后视网膜结构得到逐渐恢复。模型组在再灌注后6h、12hbcl-2/Bax比率上升，24h、48h、72h下降。治疗组bcl-2/Bax比率下降不明显。模型组中，再灌注1h后caspase-3在

5、视网膜神经节细胞层和内核层表达开始出现升高，6h明显升高，12h达到高峰，24h开始下降，与对照组相比有差异。survivin在再灌注12h开始增加，24h达到高峰，以后逐渐降低。与模型组比较，治疗组survivin降低缓慢，在12h以后survivin/caspase-3比率开始升高。结论初步证实复方苗药对于大鼠视网膜缺血再灌注损伤有较为明显的保护作用。此研究对于临床药物的开发和利用具有积极意义。关键词：复方苗药；视网膜；缺血再灌注；形态学；bcl-2;Bax;caspase-3;survivin1

6、2013届硕士研究生学位论文复方苗药对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及其机制前言视网膜缺血再灌注（retinalischemia-reperfusion，RIR）损伤是临床上广泛关注的问题。视网膜组织代谢极为旺盛，其内层的血液供应又来自于终末分支[1]的视网膜血管，因此对于缺血、缺氧极为敏感。视网膜组织是视觉神经元所在处，一旦发生缺血、缺氧对视觉损伤极为严重。例如临床上常见的视网膜中动脉阻塞、青光眼、糖尿病引起的视觉障碍等。因此在研究其发生发展机制，对防治RIR损伤具有重要意义。RIR损伤的机制包

7、括氧自由基学说、一氧化氮学说、钙通道学说、炎症反应学说、兴奋性氨基酸学说、基因调控学说、细胞凋亡学说等[2]。复方苗药（主方成分：五花血藤、透骨草、见血飞）具有清热解毒、活血、祛风、止痛等功效，药理学研究表明该药成分具有提高小鼠耐缺氧能力，能扩张小动脉，同时还能抑制大鼠TNF-α、IL-6的异常分泌作用。本研究拟采用复方苗药实验性防治视网膜缺血再灌注损伤，探讨其对RIR损伤的治疗效果，以期为临床应用该药治疗视网膜缺血性疾病提供新的治疗策略。22013届硕士研究生学位论文复方苗药对大鼠视网膜缺血再灌注损

8、伤的保护作用及其机制材料与方法1实验动物健康成年SD（SpragueDawley）大鼠72只（无眼疾），体重在180g~250g，雌雄不限，由贵阳医学院实验动物中心提供（合格证号：SCXK（黔）[2002-0001]）2主要试剂2.1兔SP检测试剂盒北京中山金桥生物技术有限公司2.1.1兔两步法检测试剂盒2.1.23%H2O2去离子水2.2DAB显色试剂盒北京中山金桥生物技术有限公司2.3RabbitAnti－bcl-2（c21）武汉博士德生物工程有限公