骨折术后舒筋活络熏洗法应用时机的实验及临床研究

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2、广州中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者日期：论文新签名腽丁乏07口,-1‘摘要删IIlIPIlllllll+llllllIJlllJllllll／IPIllJlllY2623208目的：舒筋活络熏洗法是骨科临床上应用较多的治疗方法，具有疏通经络、散瘀消肿的作用，能够促进肢体功能的恢复。但在临床实践中发现，部分骨折患者过早采用舒筋活络中药熏洗患处后，出现了局部皮肤发红、软组织肿胀、

3、疼痛等症状，严重者甚至造成软组织的硬化及骨化，而推迟使用此法的患者则较少出现这些不良反应。为什么会出现这种不良反应?是否提示该不良反应的发生与中药熏洗的应用时机存在着相关性?那么何时应用中药熏洗才合适呢?本课题旨在采用组织学、分子生物学技术，在损伤症候指数、组织病理学、细胞因子等方面，探讨舒筋活络熏洗损伤软组织后出现不良反应的原因及其发生机制；在不同时间点应用舒筋洗药熏洗干预后，酶联免疫分析法检测(ELISA)血清中IL一113、IL一6的含量，免疫组化、RT—PCR及Western-blot等方法相结

4、合检测损伤软组织中PDGF、TGF—t3的蛋白表达变化，为研究适时合理应用中药熏洗干预提供理论基础；临床研究以涉及肘关节的骨折为代表，在不同时间点运用舒筋洗药熏洗进行干预，从疼痛、肿胀程度、肘关节ROM、皮肤反应情况、安全性及Mayo肘关节功能评分等方面进行评价，并结合实验研究结果，全面探讨分析创伤骨折术后中药熏洗应用的合适时机，以指导临床实践。方法：1．实验研究一成年健康SPF级SD大鼠60只，体重220±209，雌雄各半，适应性喂养一周后，参照文献进行造模。造模后，按照NDST新药设计标准要求，将大

5、鼠随机分为4组：正常大鼠组、模型组、生理盐水组、舒筋洗外用颗粒组(简称舒筋洗组)，每组15只。大鼠造模后第2周(伤口己愈合)开始进行干预措施，舒筋洗组采用舒筋洗外用颗粒熏洗患肢，生理盐水组采用0．9％氯化钠注射液熏洗患肢，模型组造模后不采用任何干预措施，正常大鼠组不予任何处理。舒筋洗组、生理盐水组大鼠每天进行熏洗2次(水温控制在40—45。C)，每次30分钟。舒筋洗组、生理盐水组在采用干预措施后的第7天、14天、21天三个时相点取材，每组每次5只。模型组、正常组与前两组同期取材，每组每次5只。观察及检测

6、指标有损伤症候指数、酶联免疫分析法检测(ELISA)血清中IL-1B与IL-6的含量、HE染色病理组织形态学观察、免疫组化、RT—PCR及Western—blot等方法相结合检测损伤软组织中PDGF与TGF一13的蛋白表达变化。统计方法采用SPSSl6．0软件进行统计，各组均数比较采用单因素方差分析，组间比较若方差齐性采用最小显著差法(LSD)，组间比较若方差不齐采用Dnnett法。2．实验研究二成年健康SPF级SD大鼠60只，体重220±209，雌雄各半，造模同上。造模后，按照NDST新药设计标准要求

7、，将动物随机分为A组、B组、C组和D组，每组15只。A组是在造模后第二周(伤口己愈合)开始采用舒筋洗外用颗粒熏洗干预，B组是在造模后第三周干预，C组是在造模后第四周干预，D组在造模后不采用任何干预措施。A、B、C组大鼠每天均进行熏洗2次(水温控制在40—45。C)，每次30分钟。每组观察周期为3周，每周每组处死5只大鼠取材。观察及检测指标有损伤症候指数，酶联免疫分析法检测(ELISA)血清中IL-I13、IL一6的含量，HE染色病理组织形态学观察，免疫组化、RT—PCR及Western-blot等方法相

8、结合检测损伤软组织中PDGF与TGF-B的蛋白表达变化。统计方法同上。3．临床研究本研究以涉及肘关节的骨折为代表，病例全部来自佛山市中医院骨科住院患者，共120例，病例收集时间2012年6月至2013年12月。按照随机原则以入诊的先后顺序分为：A组30例，男17例，女13例，平均年龄(33．03±9．53)；B组30例，男18例，女12例，平均年龄(34．90±10．20)；C组30例，男15例，女15例，平均年龄(34．66±10．89)