amd3100骨髓动员剂及单核细胞亚型变化对小鼠皮肤创面愈合模型影响的实验研究

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1、硕士学位论文(专业学位)学校代码：10023学号：S2010004025AMD3100骨髓动员剂及单核细胞亚型变化对小鼠皮肤创面愈合模型影响的实验研究TheEffectofBoneMarrowMobilizingAgentm仍3100andAlterationsinMonocyteSubpopulationsonCutaneousWoundHealinginMice所院：整形外科医院姓名：曹艺美指导教师：赵振民导师小组：尹宁北，王永前学科专业：外科学研究方向：完成日期：2013．4．23i目录4IIIIIIllJIIII

2、IIFIllIIII}Y2340357中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5前言⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7翮吾⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”f正文：AMD3100骨髓动员剂及单核细胞亚型变化对小鼠皮肤创面愈合模型影响的实验研究目的⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．9材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯···⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14{寸论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯··⋯⋯·⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25论文参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27全文综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32综述参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38附录1全文图片⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯40附录2

4、全文表格⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯60附录3符号说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6l致j射⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62原创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯632AMD3100骨髓动员剂及单核细胞亚型变化对小鼠皮肤创面愈合模型影响的实验研究中文摘要目的建立小鼠背部皮肤全层缺损模型，应用AMD3100进行骨髓动员，研究在骨髓动员情况下单核巨噬细胞的亚型变化及其对创面愈合的影响。方法将小鼠分为实验组和对照组，单

5、剂量实验组造模前40分钟给于腹腔注射5mg／kgAMD3100，对照组注射等量PBS。同时于小鼠背部造出5mm的创面。确定6小时、12小时、1天、3天、7天、14天为取材的时间点，通过大体观察、组织切片、免疫组化、流式细胞术等手段来观察愈合情况及单核细胞动力学变化。另外，采用每隔24小时腹腔重复注射AMD31005mg／Kg，对照组则注射等剂量PBS。术后1天、2天、3天观察伤后愈合情况。．结果除1只单次注射实验组小鼠术后约3小时死亡外，其他的小鼠均存活良好。实验组创面较对照组愈合明显，创伤后7天时，单次注射组和对照组创

6、面面积分别为1．28±O．95mm2、3．14+2．84mm：，p<0．05。连续注射组实验组创面愈合较对照组较慢，创伤后3天时，连续注射组和对照组创面面积分别是17．65±2．60mm2、15．12±2．74mm2，p<0．05。组织切片脏染色显示创伤后早期(6小时-24小时)单次注射实验组中性粒细胞、单核细胞等炎症浸润较对照组提前出现，以血管周围明显，伴毛细血管扩张、水肿等。创伤后3天，单次注射实验组微血管生成较对照组多，细胞数量增多，以核大深染的类上皮细胞为多。创伤后7一14天，单次注射实验组纤维母细胞增多，微血管

7、增生。内皮细胞及成纤维母细胞增多。免疫组化显示单次注射实验组的Ct．SMA阳性增高，微血管密度增加。单次注射实验组CD68表达较对照组高。流式细胞术显示单次注射实验组Gr-1n曲CDllb+细胞群于创伤后6小时、12小时、1天、3天、7天占门内细胞总数分别为46．78+5．70％，19．09±9．25％，14．53±4．19％，4．15±1．81％，11．5l±8．78％。对3照组分别为23．58±5．85％，27．63±1．42％，15．72±4．97％，9．90±0．60％，9．33±O．91％。在6小时、3天时二者

8、有显著性差异。在皮肤组织中，Gr-1¨曲CDIIb+细胞群在6小时、1天和3天时占比例分别为：L35±0．06％，3．72±1．82％，2．71±1．68％，而对照组为0．86_+0．18％，3．00__0．59％和1-66+0．15％。在6小时二者有显著性差异。结论通过单剂量AMD3100阻断SDF一1／CXCR4