草鱼肌肉中呋喃唑酮代谢物检测能力验证样品制备研究

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1、学校代码：10264研究生学号：M150150300上海海洋大学硕士学位论文题目：草鱼肌肉中呋喃唑酮代谢物检测能力验证样品制备研究ThePreparationofFurazolidone英文题目：MetabolitesinGrassCarpfortheProficiencyTest专业：渔业研究方向：水产品质量与安全姓名：田娟娟指导教师：刘欢二O一八年五月上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含

2、任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签

3、名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注艾晓辉长江水产研究所研究员主席宋怿中国水产科学研究院研究员委员常志强黄海水产研究所副研究员委员任源远中国水产科学研究院实验员答辩秘书中国水产科学研究院答辩地点答辩日期2018.05.22会议室415上海海洋大学硕士学位论文草鱼肌肉中呋喃唑酮代谢物检测能力验证样品制备研究摘要能力验证是利用实验室间比对，按照预先制定的准则评价参加者的能力，也称能力验证活动。能力验证可用来评价实验室内部质量管理，考核检测人员技术水平，检测实验室仪器设备运行状态，提高实验室检测

4、结果的可信度。能力验证活动中样品制备是其关键环节，样品的成功研制是该活动顺利进行的前提，而样品中适宜的目标物浓度对能力验证的实施开展也有重要影响，目标物残留浓度太高或者太低都达不到考核的目的。有研究表明，活体动物实验中，给药方式、水温、养殖时间、规格等因素对药物代谢残留有很大影响，但是关于如何控制上述因素以实现能力验证考核样品需要的药物残留浓度鲜有报道。采用暴露实验制备能力验证考核样品的过程中，仍有以下问题尚未解决：一是在药浴动物的过程中，上述因素与动物肌肉中药物残留浓度水平的关系如何？如何控制上述因素实现能力验证考核样品需要的药物残留浓度？

5、二是如何确保制备得到的鱼肉基质考核样品的均匀性和稳定性？从近年来农业部对水产品药物残留监控情况看，禁用药物硝基呋喃类药物代谢物超标事件时有发生，硝基呋喃类代谢物是需要重点监管的对象，并且也是国家认监委、农业部等部门每年组织开展的水产品药物残留检测能力验证必考的指标之一。因此，本文以草鱼肌肉组织为载体，研究制备呋喃唑酮代谢物（AOZ）检测能力验证I上海海洋大学硕士学位论文样品，对评价实验室内部质量管理，提高实验室检测能力以及完善目前水产品中药物残留检测能力验证工作意义重大。本论文的主要研究结果概括如下：1、研究了草鱼肌肉中呋喃唑酮代谢物3-氨基

6、-2-恶唑烷基酮（3-amino-2-oxazolidinone，AOZ）检测能力验证样品制备中草鱼的养殖条件。实验采取药浴给药的方式，研究了水温、药浴时间、鱼体规格等因素对草鱼肌肉中呋喃唑酮代谢物AOZ残留浓度的影响，并以肌肉基质中AOZ残留浓度8µg/kg和25µg/kg为目标，确定了草鱼的养殖试验条件。结果表明：低温条件（20℃）下鱼体对药物的代谢富集较慢，高温条件下（30℃）草鱼容易死亡，在温度为室温时鱼体活跃状态良好，代谢富集较快，选择水温为（25±1）℃；药浴8~12h，残留浓度变化相对稳定，考虑到尽量缩短时间及结果的稳定性，确定

7、药浴时间为10h；鱼体规格大小对鱼体代谢也有很大影响，通过对不同规格草鱼进行分组试验，最终定为900~1100g。2、在养殖条件确定的基础上，根据预实验初始药浴浓度为x=100μg/L，草鱼肌肉中AOZ残留量（y）为21.57μg/kg，确立了药浴初始浓度x（µg/L）与草鱼肌肉中残留的AOZ浓度y（µg/kg）之间的相关性为y=0.22x。以草鱼肌肉中低（5-10µg/kg）、高（大于20µg/kg）2组残留浓度为预期目标，对关系式y=0.22x共进行了14个批次的平行验证，并对验证的结果进行统计分析，期望值与实测值不存在显著性差异，证明了

8、关系式的可行性。II上海海洋大学硕士学位论文3、实验采用真空冷冻干燥技术，以草鱼肌肉组织为载体，研究并建立了呋喃唑酮代谢物AOZ能力验证样品制备的方法。主要步骤为：