b细胞型非霍奇金淋巴瘤chfr基因mrna表达与启动子区甲基化相关性研究

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1、B细胞型非霍奇金淋巴瘤CHFR基因mRNA表达与启动子区甲基化相关性研究摘要目的检测B细胞型非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)组织中CHFR基因mRNA表达水平及其与启动子区甲基化的关系，同时探讨CHFR表达及甲基化水平与B细胞型非霍奇金淋巴瘤临床病理特征的关系。方法采用荧光定量PCR方法检测8l例B细胞型非霍奇金淋巴瘤组织和38例淋巴结反应性增生组织(RH)中CHFRmRNA的表达水平；采用甲基化特异性PCR方法检测B-NHL组织及RH组织中CHFR基因甲基化水平。结果①81例B-NHL组织中不同程度低水平表达CHFRmRN

2、A，其中2例表达缺失，而在淋巴结反应性增生组中该基因全部表达，B-NHL组CHFRmRNA相对表达量为0．21±0．12，对照组CHFRmRNA相对表达量为0．27±0．13，B-NHL组明显低于对照组(P：-O．013)。81例B-NHL患者中21例患者出现CHFR基因启动子区甲基化，38例RH组织中未发现CHFR基因甲基化，差异有统计学意义(P：-O．001)。@B-NHL组织样本中甲基化组CHFRmRNA的相对表达量为0．13±0．05，非甲基化组CHFRmRNA的相对表达量为0．23±0．12，前者明显低于后者(

3、尺0．01)，CHFRmRNA表达水平降低和启动子区甲基化负相关(r=0．269，P：-O．015)。@B-NHL患者中III+IV期CHFRmRNA相对表达量为0．17±0。09，I+II期患者的相对表达量为0．23±0．13，前者明显低于后者，差异有统计学意义(P：-O．024)；B-NHL按IPI评分分0～1分组和2—5分组，高评分组CHFRmRNA相对表达量为0．17±0．09，低评分组相对表达量为0．23±0．13，前者明显低于后者，差异具有统计学意义(P：-O．042)。CHFRmRNA相对表达量与患者发病时

4、年龄、有无全身症状、LDH水平、EC06评分及性别无差异性(P均>0．05)。发生甲基化的2l例B-NHL患者中III+IV期甲基化率为41．7％，I+II期患者甲基化率为13．3％，前者明显高于后者，二者差异具有统计学意义(x2=8．36，P：-O．004)；发生甲基化的21例患者中IPI评分0-1分组8例(20％)，2—5分组13例(65％)，二者CHFR甲基化表达存在差异(X2=5．26，P：-O．022)。CHFR甲基化在患者发病时年龄、有无全身症状、LDH水平、ECOG评分及性别方面的差异无统计学意义(尸均>0

5、．05)。结论①非霍奇金淋巴瘤组织中CHFR基因mRNA表达水平降低或缺失，CHFR基因启动子区异常甲基化在非霍奇金淋巴瘤中是频发事件，提示CHFRmRNA异常表达及启动子区甲基化参与了淋巴瘤的发生；②CHFR基因mRNA表达水平降低与其启动子区发生甲基化负相关，提示在非霍奇金淋巴瘤的发生过程中，CHFR启动子区甲基化可能导致了该基因mRNA表达下调或缺失，使CHFR基因对细胞有丝分裂的调控功能失活，从而导致淋巴瘤的发生；③CHAR基因表达下调及启动子区甲基化在B-NHL患者的临床分期及IPI评分方面具有差异，提示CHF

6、R基因可能与肿瘤的发生及进展相关，mRNA表达下调及启动子去甲基化是预后不良的因素。硕士研究生：高艳华(儿科学)指导老师：宋爱琴副教授关键词：B细胞型非霍奇金淋巴瘤；CHFR基因；甲基化；实时荧光定量PCR；MSPStudyofmRNAexpressionlevelandhypermethylaionofCHFRpromoterB—cellNon—Hodgkin’SlymphomaAbstractobjectiveToinvestigatetherelationshipbetweentheCHFRexpressionle

7、velandaberrantmethylationinnon-Hodgldnlymphoma(NHL)，andanalyzedthecorrelationbetweenCHFRaberrantexpressionandclinic—pathologicalcharacteristics．MethodsTheexpressionofCHFRmRNAweredetectedbyReal—timefluorescencequantitativePCRaswellas38reactivehyperplasiaoflymphnod

8、e(RH)samples．Themethylation—specificpolymerasechainreaction(MSP)wasusedtoexaminethemethylationstatusofCHFRgenepromoterin81NHLpatientsand38RHtissues．ResultsQCHF