b细胞型非霍奇金淋巴瘤chfr基因mrna表达与启动子区甲基化相关性研究

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时间:2019-03-08

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1、B细胞型非霍奇金淋巴瘤CHFR基因mRNA表达与启动子区甲基化相关性研究摘要目的检测B细胞型非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)组织中CHFR基因mRNA表达水平及其与启动子区甲基化的关系,同时探讨CHFR表达及甲基化水平与B细胞型非霍奇金淋巴瘤临床病理特征的关系。方法采用荧光定量PCR方法检测8l例B细胞型非霍奇金淋巴瘤组织和38例淋巴结反应性增生组织(RH)中CHFRmRNA的表达水平;采用甲基化特异性PCR方法检测B-NHL组织及RH组织中CHFR基因甲基化水平。结果①81例B-NHL组织中不同程度低水平表达CHFRmRN

2、A,其中2例表达缺失,而在淋巴结反应性增生组中该基因全部表达,B-NHL组CHFRmRNA相对表达量为0.21±0.12,对照组CHFRmRNA相对表达量为0.27±0.13,B-NHL组明显低于对照组(P:-O.013)。81例B-NHL患者中21例患者出现CHFR基因启动子区甲基化,38例RH组织中未发现CHFR基因甲基化,差异有统计学意义(P:-O.001)。@B-NHL组织样本中甲基化组CHFRmRNA的相对表达量为0.13±0.05,非甲基化组CHFRmRNA的相对表达量为0.23±0.12,前者明显低于后者(

3、尺0.01),CHFRmRNA表达水平降低和启动子区甲基化负相关(r=0.269,P:-O.015)。@B-NHL患者中III+IV期CHFRmRNA相对表达量为0.17±0。09,I+II期患者的相对表达量为0.23±0.13,前者明显低于后者,差异有统计学意义(P:-O.024);B-NHL按IPI评分分0~1分组和2—5分组,高评分组CHFRmRNA相对表达量为0.17±0.09,低评分组相对表达量为0.23±0.13,前者明显低于后者,差异具有统计学意义(P:-O.042)。CHFRmRNA相对表达量与患者发病时

4、年龄、有无全身症状、LDH水平、EC06评分及性别无差异性(P均>0.05)。发生甲基化的2l例B-NHL患者中III+IV期甲基化率为41.7%,I+II期患者甲基化率为13.3%,前者明显高于后者,二者差异具有统计学意义(x2=8.36,P:-O.004);发生甲基化的21例患者中IPI评分0-1分组8例(20%),2—5分组13例(65%),二者CHFR甲基化表达存在差异(X2=5.26,P:-O.022)。CHFR甲基化在患者发病时年龄、有无全身症状、LDH水平、ECOG评分及性别方面的差异无统计学意义(尸均>0

5、.05)。结论①非霍奇金淋巴瘤组织中CHFR基因mRNA表达水平降低或缺失,CHFR基因启动子区异常甲基化在非霍奇金淋巴瘤中是频发事件,提示CHFRmRNA异常表达及启动子区甲基化参与了淋巴瘤的发生;②CHFR基因mRNA表达水平降低与其启动子区发生甲基化负相关,提示在非霍奇金淋巴瘤的发生过程中,CHFR启动子区甲基化可能导致了该基因mRNA表达下调或缺失,使CHFR基因对细胞有丝分裂的调控功能失活,从而导致淋巴瘤的发生;③CHAR基因表达下调及启动子区甲基化在B-NHL患者的临床分期及IPI评分方面具有差异,提示CHF

6、R基因可能与肿瘤的发生及进展相关,mRNA表达下调及启动子去甲基化是预后不良的因素。硕士研究生:高艳华(儿科学)指导老师:宋爱琴副教授关键词:B细胞型非霍奇金淋巴瘤;CHFR基因;甲基化;实时荧光定量PCR;MSPStudyofmRNAexpressionlevelandhypermethylaionofCHFRpromoterB—cellNon—Hodgkin’SlymphomaAbstractobjectiveToinvestigatetherelationshipbetweentheCHFRexpressionle

7、velandaberrantmethylationinnon-Hodgldnlymphoma(NHL),andanalyzedthecorrelationbetweenCHFRaberrantexpressionandclinic—pathologicalcharacteristics.MethodsTheexpressionofCHFRmRNAweredetectedbyReal—timefluorescencequantitativePCRaswellas38reactivehyperplasiaoflymphnod

8、e(RH)samples.Themethylation—specificpolymerasechainreaction(MSP)wasusedtoexaminethemethylationstatusofCHFRgenepromoterin81NHLpatientsand38RHtissues.ResultsQCHF

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