血管内皮生长因子(vegf)936ct基因多态性与糖尿病视网膜病变的相关性研究

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1、万方数据目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“5符号说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”9前言‘⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·11刖舌⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“⋯⋯“⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯nll材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。13结果⋯⋯⋯⋯·⋯⋯

2、⋯·⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯·⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯·19讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2l结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·28I村图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·29参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39综妄苤⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯···⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯．43至筻谢⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯·⋯”····⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯···⋯⋯⋯⋯⋯56原创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯57万方数据泰山医学院硕士学位论文血管内皮生长因子(VEGF)936C／T基因多态性与糖尿病视网膜病变的相关性研究攀究主；蒿筹蓁．懒专业：内科学．rZ7479萝艿导师：邓仰欣教授中文摘要(一)研究对象1、按照1999年WHO糖尿病诊断标准，选取2010年12月至2013年12月期间例，选取同期泰山医学院附属医院健康体检者120例，其中，男56例，

4、女64例，选1)健康对照组(NC)：入选的120例均为OGTT正常的健康体检者，其中，男2)单纯2型糖尿病组(DM组)：入选的52例患者中，男性28例，女性24例，3)非增殖性视网膜病变组(NPDR组)：入选的78例患者中，男性38例，女性4)增殖性视网膜病变组(PDR组)：入选的80例患者中，男性42例，女性38例，1)详细询问所有受试者的病史并体检，记录年龄、性别，测身高、体重、血压；万方数据泰山医学院硕士学位论文测血压：坐位休息30分钟，用台式水银血压计测量右上臂的血压3次，取平均值。绝对空腹

5、状况下准确测量身高、体重。体重指数(BMI)=体重(Kg)／身高(m)2。检查尿常规、腹部B超、心电图，行眼底检查或眼底造影，检测神经传导速度。2)采用葡萄糖氧化酶法(草酸钾氧化钠抗凝：2mg／mL血液)检测受试者的空腹及餐后2h血糖，低压液相层析柱法(EDTA抗凝全衄，EDTA：I缸量=1．5mg／mL)检测HbAlc，全自动生化分析仪检测血脂、肝、肾功，放射免疫法测定血浆胰岛素或C肽，应用电化学发光法测定尿AER；酶联免疫吸附测定法(enzyme1inkedimmunosorbentassay,

6、ELISA)检测血清中VECF水平(试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司)，严格按照试剂盒说明书进行操作。2．将EDTA抗凝全血2mI(EDTA：面I．量=1．5mg／mL)分离去除血浆后保存于一20℃的冰箱中，用于抽提基因组DNA。3．采用聚合酶链反应一限制性片断长度多态性(PCR—RFLP)来测定VEGF936C／T基因多态性。4．：基因组DNA的提取、保存：取EDTA抗凝血100uL，采用试剂盒法提取外周血白细胞的DNA，用紫外分光光度法测定DNA的浓度、纯度，抽提后的基因组DNA用TE溶解后

7、，于一80℃长期冻存。5．目的基因片段的扩增：用外周血白细胞的基因组DNA为模板来进行PCR扩增，501xl的反应体系中约含400ng的基因组DNA，上、下游引物各1．0uL(10Pmmol／u1)，TaqDNA聚合酶2U，dNTP4ul(2．5mmol／uL)，与Taq酶相对应的10xPCRBuffer5p．1，余用蒸馏水补足。在热循环仪上进行反应：95。C预变性5min后接着94。C变性30s，68℃退火30s后接着72℃延伸lmin，重复进行30个循环后在72℃延伸10rain。6．限制性片断

8、长度多态性(PCR．RFLP)检测：当凝胶电泳证实PCR扩增成功，就取PCR产物101xL，加入限制性内切酶NlalII和相应酶解反应缓冲液在37"C孵3小时后，取酶切产物10此行4％琼脂糖凝胶电泳，在紫外灯下观测基因型(CC型：208bP；CT型：208bP，122bP’86bP；TT型：122bP,86bP)，摄片计数。7．统计学处理：采用SPSSl3．0处理所有数据，以均数4-标准差(X士s)表示正态分布资回归进行分析。结果：2万方数据泰山医学院硕士学位论文1．