飞龙掌血抑菌成分作用机制研究

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1、ANTIBACTERIALCOMPONENTANDMECHANISMOF7℃DD彳厶MASIATICA(LINN)LAM．ADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofChineseMateriaMedicaByWangPeiqingSupervisor：Prof．KangWenyiandSeniorengineerYuXiuhuaJune，2014关于学位论文独立完成和内容创

2、新的声明本人向河南大学提出硕士学位中请。本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立完成的，对所研究的课题有新的见解。据我所知，除文中特别加以说明、标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过酌研究成果，也不包括其他人为获得任何教育、科研机构的学住或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意：，．学位孛请人(学住懿蟾孝)鲻：量逛．鲤一0．、。11

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5、本人经河南大学审核批准援子硕士学位。作为学位论文的祚者，本人完全了解并同意河南走学有关保留≤—袭用攀镞赡囊韵要求，即河南大学有权向国家图书馆、科研信息挺构、数据收集机构和本校图书馆等提供学位论文(纸质文本乖电子文本)以供公众检索、查阅。?本认．授权河南大学出于宣扬、展览学校学术发展和进行学术交流等冒妁，可麒采取影印、缩印、扫描乖拷贝等复制手段保存、汇编学位论文(熏氐质文本和电子文本)。(涉及保密内容的学位论文在解密后适用本授权书)学位获得者(学住论文作者)签名：耋壅绰20JU年上月J加学位论文指导教师签名：：醚垒堑20f够年f月『沙摘要随着抗生素广泛的应用，细菌

6、耐药性日趋严重，从中草药中寻找活性天然产物的研究较为活跃。大多数具有清热解毒功效的中草药具有抗感染的作用，而且细菌还对中药很少产生耐药性，因此从中草药中筛选出有效抑菌成分具有重要的意义。本论文由四章组成。第一章研究了飞龙掌血不同极性萃取部位对金黄色葡萄球菌(SA)、耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)和产∥．内酰胺酶金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性；第二章采用HPLC法，建立了飞龙掌血中白屈菜红碱的含量测定方法；第三章通过研究碱性磷酸酶、电导率、胞外蛋白含量、十二烷基磺酸钠．聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS．PAGE)、扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)的变化，阐述

7、白屈菜红碱对受试菌的作用机制；第四章综述了近年来自屈菜红碱的药理活性研究进展。第一章飞龙掌血不同极性萃取部位的体外抗菌活性研究采用纸片扩散发(K．B法)分别测定了飞龙掌血不同极性萃取部位对测试菌的抑菌圈大小(IZ)、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)；液体培养法测定了半数抑制浓度(IC50)。结果显示，飞龙掌血根的石油醚部位和乙酸乙酯部位对SA和MRSA均有一定的抑制作用，但对产口．内酰胺酶金黄色葡萄球菌没有活性。第二章HPLC法测定飞龙掌血中白屈菜红碱的含量本章采用HPLC法，测定了飞龙掌血根中白屈菜红碱的含量，并进行了一系列的方法学验证。结果表明

8、，飞龙掌血根的乙酸乙酯部位中白屈菜红碱含量最高(1．97mg／g)，而飞龙掌血根的石油醚部位中白屈菜红碱的含量最低，仅为O．04mg／g。第三章飞龙掌血中白屈菜红碱抑菌机制的研究采用K．B法测定了白屈菜红碱对测试菌的IZ、MIC和MBC，液体培养法测定了Ic50。结果显示，白屈菜红碱对SA、MRSA和产口．内酰胺酶金黄色葡萄球菌都具有很强的抑制作用。通过研究AKP含量、电导率、胞外蛋白含量、SDS．PAGE蛋白谱带、SEM和TEM这些方面的变化，探明白屈菜红碱对SA、MRSA和产∥．内酰胺酶金黄色葡萄球菌的作用机制。研究表明：白屈菜红碱部分破坏了细菌细胞壁和细胞

9、膜的结构，导致壁膜的透性增加，细胞内容物外漏，同时它还对细菌蛋白质的合成和表达造成一定的影响，使菌体内蛋白质减少，最终导致细菌细胞受损甚至死亡。第四章白屈菜红碱的药理活性研究进展本章综述了白屈菜红碱的药理活性研究进展。关键词：飞龙掌血，HPLC，抗菌活性，抑菌机制，白屈菜红碱，SA，MRSA，产∥-内酰胺酶金黄色葡萄球菌，研究进展IIABSTRACTW油theextensiveapplicationofantibiotics．bacterialresistanceisgettingmoreandmoreserious，itisveryvibranttofinda

10、ctivenatural